ਅਲਕਲੀਨ ਫਾਸਫੇਟੇਸ (ALP)

ਅਲਕਲੀਨ ਫਾਸਫੇਟੇਸ ਇੱਕ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਈ. ਕੋਲੀ ਸਟ੍ਰੇਨ ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ ਜੋ TAB5 ਜੀਨ ਰੱਖਦਾ ਹੈ।ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਡੀਐਨਏ ਅਤੇ ਆਰਐਨਏ ਫਾਸਫੋਮੋਨੋਏਸਟਰਾਂ ਦੇ 5´ ਅਤੇ 3´ ਸਿਰਿਆਂ ਦੇ ਡੀਫੋਸਫੋਰੀਲੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਉਤਪ੍ਰੇਰਕ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਨਾਲ ਹੀ, ਇਹ ਰਾਈਬੋਜ਼ ਦੇ ਨਾਲ-ਨਾਲ ਡੀਓਕਸੀਰੀਬੋਨਿਊਕਲੀਓਸਾਈਡ ਟ੍ਰਾਈਫੋਸਫੇਟਸ (NTPs ਅਤੇ dNTPs) ਨੂੰ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਈਜ਼ ਕਰਦਾ ਹੈ।TAB5 ਅਲਕਲਾਇਨ ਫਾਸਫੇਟੇਸ 5´ ਫੈਲਣ ਵਾਲੇ, 5´ ਮੁੜੇ ਹੋਏ ਅਤੇ ਧੁੰਦਲੇ ਸਿਰਿਆਂ 'ਤੇ ਕੰਮ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਫਾਸਫੇਟੇਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਕਾਰਜਾਂ ਵਿੱਚ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਦੇ ਫਾਸਫੋਰੀਲੇਟਿਡ ਸਿਰਿਆਂ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕਲੋਨਿੰਗ ਜਾਂ ਪੜਤਾਲ ਅੰਤ ਲੇਬਲਿੰਗ।ਕਲੋਨਿੰਗ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਵਿੱਚ, ਡੀਫੋਸਫੋਰਿਲੇਸ਼ਨ ਰੇਖਿਕ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਸਵੈ-ਲੰਘਣ ਤੋਂ ਰੋਕਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ ਲਈ ਇੱਕ ਟੈਪਲੇਟ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮਾਂ ਵਿੱਚ ਗੈਰ-ਸੰਗਠਿਤ dNTPs ਨੂੰ ਵੀ ਘਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਐਂਜ਼ਾਈਮ 5 ਮਿੰਟ ਲਈ 70 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਗਰਮ ਕਰਨ ਨਾਲ ਪੂਰੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਅਤੇ ਅਟੱਲ ਤੌਰ 'ਤੇ ਨਾ-ਸਰਗਰਮ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਬੰਧਨ ਜਾਂ ਅੰਤ ਲੇਬਲਿੰਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਫਾਸਫੇਟੇਸ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣਾ ਬੇਲੋੜਾ ਹੋ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।