ਇੱਕ ਕਦਮ ਤੇਜ਼ RT-qPCR ਪੜਤਾਲ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ-UNG
ਬਿੱਲੀ ਨੰਬਰ: HCR5143A
ਵਨ ਸਟੈਪ RT-qPCR ਪ੍ਰੋਬ ਕਿੱਟ (ਫਾਰ ਫਾਸਟ) ਇੱਕ ਜਾਂਚ-ਅਧਾਰਿਤ RT-qPCR ਫਾਸਟ ਡਿਟੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ ਹੈ ਜੋ ਸਿੰਗਲ-ਪਲੇਕਸ ਜਾਂ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਮਾਤਰਾਤਮਕ PCR ਲਈ RNA ਨੂੰ ਟੈਪਲੇਟ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ RNA ਵਾਇਰਸ) ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੀ ਹੈ।ਇਹ ਉਤਪਾਦ ਐਂਟੀਬਾਡੀ-ਸੰਸ਼ੋਧਿਤ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਇੱਕ ਨਵੀਂ ਪੀੜ੍ਹੀ ਅਤੇ ਇੱਕ-ਕਦਮ ਨੂੰ ਸਮਰਪਿਤ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਇੱਕ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਬਫਰ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਸਪੀਡ, ਉੱਚ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਹੈ।ਇਹ ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਵਿੱਚ ਘੱਟ ਅਤੇ ਉੱਚ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਵਾਲੇ ਨਮੂਨਿਆਂ ਦੇ ਸਿੰਗਲ-ਪਲੇਕਸ ਅਤੇ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਦੋਵਾਂ ਵਿੱਚ ਸੰਤੁਲਿਤ ਪ੍ਰਸਾਰ ਦਾ ਸਮਰਥਨ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ
1. 5×RT-qPCR ਬਫਰ (U+)
2. ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਸ਼ਰਣ (U+)
ਨੋਟ:
a5×RT-qPCR ਬਫਰ (U+) ਵਿੱਚ dNTP ਅਤੇ Mg ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ2+;
ਬੀ.ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਸ਼ਰਣ (U+) ਵਿੱਚ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ, ਹੌਟ ਸਟਾਰਟ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼, ਆਰਨੇਜ਼ ਇਨਿਹਿਬਟਰ ਅਤੇ ਯੂਡੀਜੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ;
c.RNase-ਮੁਕਤ ਟਿਪਸ, EP ਟਿਊਬਾਂ ਆਦਿ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
ਵਰਤਣ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ, 5×RT-qPCR ਬਫਰ (U+) ਨੂੰ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।ਜੇਕਰ ਪਿਘਲਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਕੋਈ ਵਰਖਾ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਤਾਂ ਬਫਰ ਦੇ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਵਾਪਸ ਆਉਣ ਦੀ ਉਡੀਕ ਕਰੋ, ਮਿਸ਼ਰਣ ਅਤੇ ਘੁਲਣ ਲਈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਉਹਨਾਂ ਦੀ ਆਮ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ
ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਸੁੱਕੀ ਬਰਫ਼ ਨਾਲ ਭੇਜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ 1 ਸਾਲ ਲਈ -25~-15℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਹਦਾਇਤਾਂ
1. ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਸਿਸਟਮ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | ਵਾਲੀਅਮ (20 μL ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ) |
| 2 ×RT-qPCR ਬਫਰ | 4μL |
| ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਸ਼ਰਣ (U+) | 0.8μL |
| ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਫਾਰਵਰਡ | 0.1~ 1.0μM |
| ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਰਿਵਰਸ | 0.1~ 1.0μM |
| TaqMan ਪੜਤਾਲ | 0.05~0.25μM |
| ਟੈਂਪਲੇਟ | X μL |
| RNase-ਮੁਕਤ ਪਾਣੀ | 25μL ਤੱਕ |
ਨੋਟ: ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਵਾਲੀਅਮ 10-50μL ਹੈ।
2. ਸਾਈਕਲਿੰਗ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ (Sਟੈਂਡਰਡ)
| ਸਾਈਕਲ ਕਦਮ | ਟੈਂਪ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ |
| ਉਲਟਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ | 55 ℃ | 10 ਮਿੰਟ | 1 |
| ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਕਾਰ | 95 ℃ | 30 ਸਕਿੰਟ | 1 |
| ਵਿਕਾਰ | 95 ℃ | 10 ਸਕਿੰਟ | 45 |
| ਐਨੀਲਿੰਗ/ਐਕਸਟੈਨਸ਼ਨ | 60 ℃ | 30 ਸਕਿੰਟ |
| ਸਾਈਕਲਿੰਗ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ (ਤੇਜ਼) ਸਾਈਕਲ ਕਦਮ |
ਟੈਂਪ |
ਸਮਾਂ |
ਸਾਈਕਲ |
| ਉਲਟਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ | 55 ℃ | 5 ਮਿੰਟ | 1 |
| ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਕਾਰ | 95 ℃ | 5 ਐੱਸ | 1 |
| ਵਿਕਾਰ | 95 ℃ | 3 ਐੱਸ | 43 |
| ਐਨੀਲਿੰਗ/ਐਕਸਟੈਨਸ਼ਨ | 60 ℃ | 10 ਐੱਸ |
ਨੋਟ:
aਉਲਟਾ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਤਾਪਮਾਨ 50 ℃ ਤੋਂ 60 ℃ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਹੈ, ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣਾ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਬਣਤਰਾਂ ਅਤੇ ਉੱਚ CG ਸਮੱਗਰੀ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਨੂੰ ਵਧਾਉਣ ਵਿੱਚ ਮਦਦ ਕਰਦਾ ਹੈ;
ਬੀ.ਸਰਵੋਤਮ ਐਨੀਲਿੰਗ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਦੇ Tm ਮੁੱਲ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਐਡਜਸਟ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ, ਅਤੇ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਯੰਤਰ ਦੇ ਆਧਾਰ 'ਤੇ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲ ਕਲੈਕਸ਼ਨ ਲਈ ਸਭ ਤੋਂ ਘੱਟ ਸਮਾਂ ਚੁਣੋ।
ਨੋਟਸ
ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਆਪਣੀ ਸਿਹਤ ਅਤੇ ਸੁਰੱਖਿਆ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਜ਼ਰੂਰੀ PPE, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲੈਬ ਕੋਟ ਅਤੇ ਦਸਤਾਨੇ ਪਹਿਨੋ!
