Peroxidase (Horseradish ਸਰੋਤ) ਸਮਾਨਾਰਥੀ: ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਪਰਆਕਸਾਈਡ oxidoreductase;ਐਚ.ਆਰ.ਪੀ
ਵਰਣਨ
Horseradish peroxidase (HRP) Horseradish (Amoracia rusticana) ਦੀਆਂ ਜੜ੍ਹਾਂ ਤੋਂ ਵੱਖ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਪੈਰੋਕਸੀਡੇਸ ਦੇ ferroprotoporphyrin ਸਮੂਹ ਨਾਲ ਸਬੰਧਤ ਹੈ।HRP ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਪਰਆਕਸਾਈਡ (H2O2) ਨਾਲ ਮਿਲ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਨਤੀਜੇ ਵਜੋਂ [HRP-H2O2] ਕੰਪਲੈਕਸ ਹਾਈਡ੍ਰੋਜਨ ਦਾਨੀਆਂ ਦੀ ਇੱਕ ਵਿਸ਼ਾਲ ਕਿਸਮ ਦਾ ਆਕਸੀਕਰਨ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ:
ਦਾਨੀ + H2O2 → ਆਕਸੀਡਾਈਜ਼ਡ ਡੋਨਰ + 2 H2O
HRP ਵੱਖ-ਵੱਖ ਸਬਸਟਰੇਟਾਂ ਨੂੰ ਆਕਸੀਕਰਨ ਕਰੇਗਾ (ਸਾਰਣੀ 1 ਦੇਖੋ):
• ਕ੍ਰੋਮੋਜਨਿਕ
• ਕੈਮੀਲੂਮਿਨਸੈਂਟ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲੂਮਿਨੋਲ ਜਾਂ ਆਈਸੋਲੂਮਿਨੋਲ)
• ਫਲੋਰੋਜਨਿਕ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਟਾਇਰਾਮਾਈਨ, ਹੋਮੋਵੈਨੀਲਿਕ ਐਸਿਡ, ਜਾਂ 4-ਹਾਈਡ੍ਰੋਕਸਾਈਫਿਨਾਇਲ ਐਸੀਟਿਕ ਐਸਿਡ)
HRP ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ ਚੇਨ ਪੌਲੀਪੇਪਟਾਈਡ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਚਾਰ ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬ੍ਰਿਜ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।HRP ਇੱਕ ਗਲਾਈਕੋਪ੍ਰੋਟੀਨ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 18% ਕਾਰਬੋਹਾਈਡਰੇਟ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਕਾਰਬੋਹਾਈਡਰੇਟ ਦੀ ਰਚਨਾ ਵਿੱਚ ਖਾਸ ਆਈਸੋਜ਼ਾਈਮ ਦੇ ਅਧਾਰ ਤੇ, ਗੈਲੇਕਟੋਜ਼, ਅਰਾਬੀਨੋਜ਼, ਜ਼ਾਈਲੋਜ਼, ਫਿਊਕੋਜ਼, ਮੈਨਨੋਜ਼, ਮਾਨੋਸਾਮਾਈਨ ਅਤੇ ਗਲੈਕਟੋਸਾਮਾਈਨ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।
HRP ਇਮਯੂਨੋਬਲੋਟਿੰਗ, ਇਮਯੂਨੋਹਿਸਟੋਕੈਮਿਸਟਰੀ, ਅਤੇ ELISA ਸਮੇਤ ਬਹੁਤ ਸਾਰੇ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਇਮਯੂਨੋਕੈਮਿਸਟਰੀ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ ਵਿੱਚ ਇਮਯੂਨੋਗਲੋਬੂਲਿਨ ਲਈ ਇੱਕ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਣ ਵਾਲਾ ਲੇਬਲ ਹੈ।ਐਚਆਰਪੀ ਨੂੰ ਕਈ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੁਆਰਾ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਨਾਲ ਜੋੜਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਗਲੂਟਾਰਾਲਡੀਹਾਈਡ, ਪੀਰੀਅਡੇਟ ਆਕਸੀਕਰਨ, ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬਾਂਡਾਂ ਰਾਹੀਂ, ਅਤੇ ਅਮੀਨੋ ਅਤੇ ਥਿਓਲ ਨਿਰਦੇਸ਼ਿਤ ਕਰਾਸ-ਲਿੰਕਰਾਂ ਦੁਆਰਾ ਵੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ।ਐਚਆਰਪੀ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਲਈ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਲੋੜੀਂਦਾ ਲੇਬਲ ਹੈ, ਕਿਉਂਕਿ ਇਹ ਤਿੰਨ ਸਭ ਤੋਂ ਪ੍ਰਸਿੱਧ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਲੇਬਲਾਂ (ਪੇਰੋਕਸੀਡੇਜ਼, β-ਗੈਲੈਕਟੋਸੀਡੇਜ਼, ਅਲਕਲੀਨ ਫਾਸਫੇਟੇਜ਼) ਵਿੱਚੋਂ ਸਭ ਤੋਂ ਛੋਟਾ ਅਤੇ ਸਭ ਤੋਂ ਸਥਿਰ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸਦਾ ਗਲਾਈਕੋਸੀਲੇਸ਼ਨ ਘੱਟ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਬਾਈਡਿੰਗ ਵੱਲ ਅਗਵਾਈ ਕਰਦਾ ਹੈ।ਗਲੂਟਰਾਲਡੀਹਾਈਡ ਅਤੇ ਪੀਰੀਅਡੇਟ ਸੰਜੋਗ ਵਿਧੀਆਂ ਦੀ ਸਮੀਖਿਆ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।
ਪੇਰੋਕਸੀਡੇਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਗਲੂਕੋਜ਼ 4 ਅਤੇ ਪੇਰੋਆਕਸਾਈਡ ਦੇ ਨਿਰਧਾਰਨ ਲਈ ਵੀ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਕਈ ਪ੍ਰਕਾਸ਼ਨਾਂ, 6-24 ਥੀਸਿਸ, 25-29 ਅਤੇ ਖੋਜ ਨਿਬੰਧ 30-46 ਨੇ ਆਪਣੇ ਖੋਜ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਵਿੱਚ P8375 ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਦਾ ਹਵਾਲਾ ਦਿੱਤਾ ਹੈ।
ਰਸਾਇਣਕ ਬਣਤਰ
ਨਿਰਧਾਰਨ
ਟੈਸਟ ਆਈਟਮਾਂ | ਨਿਰਧਾਰਨ |
ਵਰਣਨ | ਲਾਲ-ਭੂਰੇ ਅਮੋਰਫਸ ਪਾਊਡਰ, lyophilized |
ਸਰਗਰਮੀ | ≥100U/mg |
ਸ਼ੁੱਧਤਾ(SDS-PAGE) | ≥90% |
ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ (10mg ਪਾਊਡਰ/ml) | ਸਾਫ਼ |
ਪਾਚਕ ਪਾਚਕ | |
NADH/NADPH ਆਕਸੀਡੇਸ | ≤0.1% |
ਕੈਟਾਲੇਸ | ≤0.005% |
ATPase | ≤0.03% |
ਆਵਾਜਾਈ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ਼
ਆਵਾਜਾਈ:2-8 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਭੇਜਿਆ ਗਿਆ
ਸਟੋਰੇਜ:-20 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ (ਲੰਮੀ ਮਿਆਦ), 2-8 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ (ਛੋਟੇ ਸਮੇਂ) 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ
ਮੁੜ-ਟੈਸਟ ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀਜੀਵਨ:2 ਸਾਲ