ਰਿਬੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਏ (RNase A)

Ribonuclease A (RNase A) ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਪੌਲੀਪੇਪਟਾਈਡ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ 13.7 kDa ਦੇ ਅਣੂ ਭਾਰ ਦੇ ਨਾਲ 4 ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬਾਂਡ ਹਨ।RNase A ਇੱਕ ਐਂਡੋਰੀਬੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਹੈ ਜੋ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ C ਅਤੇ U ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ 'ਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਕਲੀਵੇਜ ਇੱਕ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਦੇ 5'-ਰਾਈਬੋਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਏ ਗਏ ਫਾਸਫੋਡੀਸਟਰ ਬਾਂਡ ਨੂੰ ਪਛਾਣਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਨਾਲ ਲੱਗਦੇ ਪਾਈਰੀਮੀਡੀਨ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਦੇ 3'-ਰਾਈਬੋਜ਼ 'ਤੇ ਫਾਸਫੇਟ ਸਮੂਹ ਨੂੰ ਪਛਾਣਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ 2', 3' - ਸਾਈਕਲਿਕ ਫਾਸਫੇਟਸ ਨੂੰ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਈਜ਼ਡ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ। 3'-ਨਿਊਕਲੀਓਸਾਈਡ ਫਾਸਫੇਟਸ (ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, pG-pG-pC-pA-pG ਨੂੰ pG-pG-pCp ਅਤੇ A-PG ਬਣਾਉਣ ਲਈ RNase A ਦੁਆਰਾ ਕਲੀਵ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ)।RNase A ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਕਲੀਵ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਰਗਰਮ ਹੈ ਅਤੇ ਕਈ ਤਰ੍ਹਾਂ ਦੀਆਂ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਸਥਿਤੀਆਂ ਵਿੱਚ ਸਰਗਰਮ ਹੈ: ਘੱਟ ਲੂਣ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (0 ਤੋਂ 100 mM NaCl) 'ਤੇ, ਇਸਦੀ ਵਰਤੋਂ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਆਰਐਨਏ, ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਕਲੀਵ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ RNA-DNA ਹਾਈਬ੍ਰਿਡ ਵਿੱਚ RNA ਸਟ੍ਰੈਂਡਸ।ਜਦੋਂ ਕਿ ਉੱਚ ਲੂਣ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (≥0.3 M), RNase A ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਤੋੜ ਸਕਦਾ ਹੈ।