2×HiF Taq ਪਲੱਸ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ
ਬਿੱਲੀ ਨੰਬਰ: HCR2014B
HIF ਟਾਕ ਪਲੱਸ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ (ਡਾਈ ਦੇ ਨਾਲ) ਇੱਕ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਤਿਆਰ 2×ਪ੍ਰੀਮਿਕਸਡ ਹੱਲ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਪਲੱਸ HIF DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼, dNTPs, ਅਤੇ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਬਫਰ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਦੋ ਮੋਨੋਕਲੋਨਲ ਐਂਟੀਬਾਡੀਜ਼ ਜੋ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ 3′→5′ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਅਤੇ ਬਹੁਤ ਖਾਸ ਹੌਟ ਸਟਾਰਟ ਪੀਸੀਆਰ ਲਈ ਮਾਸਟਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ ਫੈਕਟਰ ਨੂੰ ਮਾਸਟਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਨੂੰ ਇੱਕ ਲੰਮਾ ਟੁਕੜਾ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸਮਰੱਥਾ ਦਿੱਤੀ ਜਾ ਸਕੇ, ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦੀ ਲੰਬਾਈ 13 kb ਤੱਕ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ, ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਵਿੱਚ ਇੱਕ 5′→3′ DNA ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ ਇੱਕ 3′→5′ ਹੈ। exonuclease ਗਤੀਵਿਧੀ, ਇਸਦੀ ਵਫ਼ਾਦਾਰੀ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਨਾਲੋਂ 83 ਗੁਣਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਆਮ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਨਾਲੋਂ 9 ਗੁਣਾ ਹੈ।ਇਹ ਗੁੰਝਲਦਾਰ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੇ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਹੈ, ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਉਤਪਾਦ ਇੱਕ ਧੁੰਦਲਾ ਅੰਤ ਹੈ.
2×HIF ਟਾਕ ਪਲੱਸ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ (ਡਾਈ ਦੇ ਨਾਲ) ਵਿੱਚ ਤੇਜ਼ ਅਤੇ ਆਸਾਨ, ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ, ਮਜ਼ਬੂਤ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ, ਚੰਗੀ ਸਥਿਰਤਾ, ਆਦਿ ਦੇ ਫਾਇਦੇ ਹਨ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਨੂੰ ਸਿਰਫ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟਸ ਨੂੰ ਜੋੜਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੁੰਦੀ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ ਦੋ ਦੁਆਰਾ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ- ਸਟੈਪ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ, ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਕਦਮਾਂ ਨੂੰ ਸਰਲ ਬਣਾਉਣਾ ਅਤੇ ਸਮਾਂ ਬਚਾਉਣਾ।ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਸੂਚਕ ਰੰਗ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਅਤੇ ਪੀਸੀਆਰ ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਲਈ ਸਿੱਧਾ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਖਾਸ ਸੁਰੱਖਿਆ ਏਜੰਟ ਵੀ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਮਾਸਟਰ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਪੰਘਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਸਥਿਰ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਕਾਇਮ ਰੱਖ ਸਕੇ।
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ
ਉਤਪਾਦਾਂ ਨੂੰ 1 ਸਾਲ ਲਈ -25~-15℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
ਨਿਰਧਾਰਨ
ਉਤਪਾਦ ਨਿਰਧਾਰਨ | ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ |
ਧਿਆਨ ਟਿਕਾਉਣਾ | 2× |
ਹਾਟ ਸਟਾਰਟ | ਬਿਲਟ-ਇਨ ਹੌਟ ਸਟਾਰਟ |
ਓਵਰਹੈਂਗ | ਬਲੰਟ |
ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦੀ ਗਤੀ | ਤੇਜ਼ |
ਆਕਾਰ (ਅੰਤਿਮ ਉਤਪਾਦ) | 13kb ਤੱਕ |
ਆਵਾਜਾਈ ਲਈ ਹਾਲਾਤ | ਸੁੱਕੀ ਬਰਫ਼ |
ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਕਿਸਮ | ਉੱਚ ਵਫ਼ਾਦਾਰੀ PCR ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ |
ਹਦਾਇਤਾਂ
1.ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | ਵਾਲੀਅਮ (μL) |
ਡੀਐਨਏ ਟੈਂਪਲੇਟ | ਅਨੁਕੂਲ |
ਫਾਰਵਰਡ ਪ੍ਰਾਈਮਰ (10 μmol/L) | 2.5 |
ਉਲਟਾ ਪ੍ਰਾਈਮਰ (10 μmol/L) | 2.5 |
2×HIF ਟਾਕ ਪਲੱਸ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ | 25 |
ddH2O | 50 ਤੱਕ |
2.ਵੱਖ-ਵੱਖ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਵਰਤੋਂ
ਟੈਂਪਲੇਟ ਦੀ ਕਿਸਮ | ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ 1kb ਤੋਂ 10 kb ਤੱਕ ਵਧਾਓ |
ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ | 50ng-200 ng |
ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਜਾਂ ਵਾਇਰਲ ਡੀ.ਐਨ.ਏ | 10pg-20ng |
cDNA | 1-2.5 µL (ਅੰਤਿਮ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਾਲੀਅਮ ਦੇ 10% ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਾ ਕਰੋ) |
3.ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
1) ਦੋ-ਪੜਾਅ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ (ਜਟਿਲਤਾ ਟੈਂਪਲੇਟ)
ਸਾਈਕਲ ਕਦਮ | ਟੈਂਪ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ |
ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਕਾਰ | 98℃ | 3 ਮਿੰਟ | 1 |
ਵਿਕਾਰ | 98℃ | 10 ਸਕਿੰਟ | 30-35 |
ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ | 68℃ | 30 ਸਕਿੰਟ/kb | |
ਅੰਤਮ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ | 72℃ | 5 ਮਿੰਟ | 1 |
2) ਤਿੰਨ-ਪੜਾਅ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ (ਰੈਗੂਲਰ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ)
ਸਾਈਕਲ ਕਦਮ | ਟੈਂਪ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ |
ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਕਾਰ | 98℃ | 3 ਮਿੰਟ | 1 |
ਵਿਕਾਰ | 98℃ | 10 ਸਕਿੰਟ | 30-35 |
ਐਨੀਲਿੰਗ | 60℃ | 20 ਸਕਿੰਟ | |
ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ | 72℃ | 30 ਸਕਿੰਟ/kb | |
ਅੰਤਮ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ | 72℃ | 5 ਮਿੰਟ | 1 |
3) ਐਨੀਲਿੰਗ ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ (ਜਟਿਲਤਾ ਟੈਂਪਲੇਟ)
ਸਾਈਕਲ ਕਦਮ | ਤਾਪਮਾਨ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ |
ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਕਾਰ | 98℃ | 3 ਮਿੰਟ | 1 |
ਵਿਕਾਰ | 98℃ | 10 ਸਕਿੰਟ | 15 (ਪ੍ਰਤੀ ਚੱਕਰ 1℃ ਕਟੌਤੀ) |
ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਐਨੀਲਿੰਗ | 70-55℃ | 20 ਸਕਿੰਟ | |
ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ | 72℃ | 30 ਸਕਿੰਟ/kb | |
ਵਿਕਾਰ | 98℃ | 10 ਸਕਿੰਟ |
20 |
ਐਨੀਲਿੰਗ | 55℃ | 20 ਸਕਿੰਟ | |
ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ | 72℃ | 30 ਸਕਿੰਟ/kb | |
ਅੰਤਮ ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ | 72℃ | 5 ਮਿੰਟ | 1 |
ਵੱਖ-ਵੱਖ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ ਦੇ ਅਧੀਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ
ਪ੍ਰੋਟੋਕੋl | ਦੋ-ਕਦਮ | ਤਿੰਨ-ਕਦਮ | ਗਰੇਡੀਐਂਟ ਐਨੀਲਿੰਗ |
ਸਪੇਕ. | ਤੇਜ਼ | ਮੱਧਮ | ਹੌਲੀ |
ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ | ਉੱਚ | ਮੱਧਮ | ਉੱਚ |
ਪੀਸੀਆਰ ਉਪਜ | ਮੱਧਮ | ਉੱਚ | ਮੱਧਮ |
ਖੋਜ ਦਰ | ਉੱਚ | ਮੱਧਮ | ਉੱਚ |
ਨੋਟਸ
ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਆਪਣੀ ਸਿਹਤ ਅਤੇ ਸੁਰੱਖਿਆ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਜ਼ਰੂਰੀ PPE, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲੈਬ ਕੋਟ ਅਤੇ ਦਸਤਾਨੇ ਪਹਿਨੋ!