BsaI ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼
ਵਰਣਨ
BsaI ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਜ਼ਾਈਮ ਇੱਕ ਕਿਸਮ II ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਹੈ ਜੋ E.coli ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਏ ਗਏ ਬੇਸਿਲਸ ਸਫੈਰਿਕਸ ਵਿੱਚ BspQI ਜੀਨ ਦੁਆਰਾ ਏਨਕੋਡ ਕੀਤੇ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ।ਜੀਨ ਮੈਪਿੰਗ, ਕਲੋਨਿੰਗ ਅਤੇ ਹੋਰ ਖੇਤਰਾਂ ਵਿੱਚ ਪਾਬੰਦੀਆਂ ਵਾਲੇ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਵਿਆਪਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ।ਇਹ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਕੁਸ਼ਲ ਜੀਨ ਲੀਨੀਅਰਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ Bsa I ਲਈ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਡੀਐਨਏ ਨੂੰ ਕੱਟਦਾ ਹੈ, ਇੱਕ IIs ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼, ਇੱਕ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਈ. ਕੋਲੀ ਸਟ੍ਰੇਨ ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ ਜੋ ਬੈਸਿਲਸ ਸਟੀਰੋਥਰਮੋਫਿਲਸ ਤੋਂ ਕਲੋਨ ਕੀਤੇ ਅਤੇ ਸੋਧੇ ਹੋਏ BsaI ਜੀਨ ਨੂੰ ਲੈ ਕੇ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਜਿਨ੍ਹਾਂ ਦੀ ਮੂਲ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਅਤੇ ਘਟੀ ਹੋਈ ਤਾਰਾ ਗਤੀਵਿਧੀ ਦੇ ਸਮਾਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਹੈ।ਇਸਦੀ ਮਾਨਤਾ ਕ੍ਰਮ ਅਤੇ ਕਲੀਵੇਜ ਸਾਈਟਾਂ ਹੇਠ ਲਿਖੇ ਅਨੁਸਾਰ ਹਨ:
5'······GGTCTC(N)········3'
3'······CCAG(NNNNN)·····5'
ਰਸਾਇਣਕ ਬਣਤਰ
ਉਤਪਾਦ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ
• ਪ੍ਰਤਿਬੰਧ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਵਿੱਚ ਉੱਚ ਐਂਜ਼ਾਈਮੇਟਿਕ ਗਤੀਵਿਧੀ ਹੁੰਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਪਾਚਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਜਲਦੀ ਪੂਰਾ ਕਰਦਾ ਹੈ।
• ਸਟੀਕ "ਸਕੈਲਪਲ" ਕੱਟਣ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਘੱਟ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ।
• ਕੋਈ BSA ਸਿਸਟਮ ਨਹੀਂ, ਗਰਮੀ ਸਰੋਤ ਪ੍ਰਦੂਸ਼ਣ ਨੂੰ ਘਟਾਉਣਾ।
ਨਿਰਧਾਰਨ
ਟੈਸਟ ਆਈਟਮਾਂ | ਨਿਰਧਾਰਨ |
ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ | 20 U/µL |
ਸ਼ੁੱਧਤਾ(SDS-PAGE) | ≥95% |
ਰਨੇਸ | ਕੋਈ ਪਤਾ ਨਹੀਂ ਲੱਗਾ |
ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ DNase ਗਤੀਵਿਧੀ | ਖੋਜਿਆ ਨਹੀਂ ਗਿਆ |
ਸਟਾਰ ਗਤੀਵਿਧੀ | ਖੋਜਿਆ ਨਹੀਂ ਗਿਆ |
ਲਿਗੇਸ਼ਨ ਅਤੇ ਰੀਕਟਿੰਗ | ਪਾਚਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, ਡੀਐਨਏ ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ ਬੰਨ੍ਹਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਅਤੇ ਇਹ ਲਿਟੇ ਹੋਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ Bsal ਨਾਲ ਦੁਬਾਰਾ ਕੱਟਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ। |
ਐਂਡੋਟੌਕਸਿਨ (LAL-ਟੈਸਟ) | ≤10 EU/mg |
ਈ.ਕੋਲੀ ਡੀ.ਐਨ.ਏ | ≤1 ਕਾਪੀ/2U |
ਗੁਣਵੱਤਾ ਕੰਟਰੋਲ
ਸ਼ੁੱਧਤਾ ≥ 95%, ਕੋਈ DNase, RNase ਗਤੀਵਿਧੀ ਨਹੀਂ, ਮੇਜ਼ਬਾਨ DNA ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ≤ 100pg/mg, ਮੇਜ਼ਬਾਨ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ≤ -50ppm, ਐਂਡੋਟੌਕਸਿਨ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ≤ 10EU/mg, ਕੋਈ ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨਹੀਂ, ਨਿਰਜੀਵ, ਮਾਈਕੋਪਲਾਸ ਤੋਂ ਮੁਕਤ
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ
ਪੌਲੀ (A/T/C/G) ਦੇ ਅੰਤ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਰੇਖਿਕ DNA ਟੁਕੜਾ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਨੂੰ ਹਜ਼ਮ ਕਰੋ;
ਵਿਟਰੋ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨੂੰ ਲੀਨੀਅਰਾਈਜ਼ ਕਰੋ;
ਪਾਬੰਦੀ ਹਜ਼ਮ;
ਯੂਨਿਟ ਪਰਿਭਾਸ਼ਾ
ਇੱਕ ਯੂਨਿਟ ਨੂੰ 50 µL ਦੀ ਕੁੱਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਾਲੀਅਮ ਵਿੱਚ 37°C 'ਤੇ 1 ਘੰਟੇ ਵਿੱਚ 1 µg ਅੰਦਰੂਨੀ ਨਿਯੰਤਰਣ DNA ਨੂੰ ਹਜ਼ਮ ਕਰਨ ਲਈ ਲੋੜੀਂਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਵਜੋਂ ਪਰਿਭਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।
ਆਵਾਜਾਈ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ਼
ਆਵਾਜਾਈ:-15 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਭੇਜਿਆ ਗਿਆ
ਸਟੋਰੇਜ:-25~-15°C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ
ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ੀ ਮੁੜ-ਟੈਸਟ ਜੀਵਨ:1 ਸਾਲ