BspQI
BspQI ਨੂੰ E. coli ਵਿੱਚ ਮੁੜ ਸੰਯੋਜਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ ਜੋ ਖਾਸ ਸਾਈਟਾਂ ਨੂੰ ਪਛਾਣ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸਦੇ ਅਧੀਨ ਪੈਦਾ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ
BspQI, ਇੱਕ IIs ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼, ਇੱਕ ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਈ. ਕੋਲੀ ਸਟ੍ਰੇਨ ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ ਜੋ ਬੈਸਿਲਸ ਸਫੈਰਿਕਸ ਤੋਂ ਕਲੋਨ ਅਤੇ ਸੋਧਿਆ BspQI ਜਨ ਲੈ ਕੇ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਖਾਸ ਸਾਈਟਾਂ ਨੂੰ ਪਛਾਣ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਮਾਨਤਾ ਕ੍ਰਮ ਅਤੇ ਕਲੀਵੇਜ ਸਾਈਟਾਂ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਹਨ:
5' · · · GCTCTTC(N) · · · · · · · · · · 3'
3' · · · · CGAGAAG(NNNN) · · · · 5'
ਉਤਪਾਦ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ
1. ਉੱਚ ਗਤੀਵਿਧੀ, ਤੇਜ਼ ਹਜ਼ਮ;
2. ਘੱਟ ਤਾਰਾ ਗਤੀਵਿਧੀ, "ਸਕੈਲਪੈਲ" ਵਰਗੀ ਸਟੀਕ ਕੱਟਣ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣਾ;
3. ਬਿਨਾ BSA ਅਤੇ ਜਾਨਵਰ-ਮੂਲ ਮੁਫ਼ਤ;
ਮੈਥਾਈਲੇਸ਼ਨ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ
Dam methylation:ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਨਹੀਂ;
Dcm methylation:ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਨਹੀਂ;
CpG ਮੈਥਿਲੇਸ਼ਨ:ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਨਹੀਂ;
ਸਟੋਰੇਜ਼ ਹਾਲਾਤ
ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਭੇਜਿਆ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ ≤ 0℃;-25~- 15℃ ਸਥਿਤੀ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ।
ਸਟੋਰੇਜ ਬਫਰ
20mM Tris-HCl, 0.1mM EDTA, 500 mM KCl, 1.0 mM dithiothreitol, 500 µg/ml ਰੀਕੌਂਬੀਨੈਂਟ ਐਲਬਿਊਮਿਨ, 0. 1% ਟ੍ਰਾਈਸ਼ਨ X- 100 ਅਤੇ 50% ਗਲਾਈਸਰੋਲ (pH 7.0 @ 25°C)।
ਯੂਨਿਟ ਪਰਿਭਾਸ਼ਾ
ਇੱਕ ਯੂਨਿਟ ਨੂੰ 50 µL ਦੀ ਕੁੱਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਾਲੀਅਮ ਵਿੱਚ 50°C 'ਤੇ 1 ਘੰਟੇ ਵਿੱਚ ਅੰਦਰੂਨੀ ਨਿਯੰਤਰਣ DNA ਦੇ 1µg ਨੂੰ ਹਜ਼ਮ ਕਰਨ ਲਈ ਲੋੜੀਂਦੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਵਜੋਂ ਪਰਿਭਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ।
ਗੁਣਵੱਤਾ ਕੰਟਰੋਲ
ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਪਰਖ (SDS-PAGE):BspQI ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ ≥95% SDS-PAGE ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੀ ਗਈ ਸੀ।
RNase:1.6μg MS2 RNA ਦੇ ਨਾਲ BspQI ਦਾ 10U 50℃ 'ਤੇ 4 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ ਐਗਰੋਜ਼ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੋਈ ਗਿਰਾਵਟ ਨਹੀਂ ਪੈਦਾ ਕਰਦਾ।
ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ DNase ਗਤੀਵਿਧੀ:BspQI ਦਾ 10U 1μg λ DNA ਦੇ ਨਾਲ 16 ਘੰਟਿਆਂ ਲਈ 50℃ 'ਤੇ, 1 ਘੰਟੇ ਲਈ 50℃ ਦੇ ਮੁਕਾਬਲੇ, ਐਗਰੋਸ ਜੈੱਲ ਇਲੈਕਟ੍ਰੋਫੋਰੇਸਿਸ ਦੁਆਰਾ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੋਈ ਵਾਧੂ DNA ਨਹੀਂ ਦਿੰਦਾ।
ਬੰਧਨ ਅਤੇ ਰੀਕਟਿੰਗ:10U BspQI ਨਾਲ 1 μg λDNA ਦੇ ਪਾਚਨ ਤੋਂ ਬਾਅਦ, DNA ਦੇ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ T4 DNA ligase ਨਾਲ 16ºC 'ਤੇ ਲਿਗੇਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਅਤੇ ਇਹ ਲਿਟੇ ਹੋਏ ਟੁਕੜਿਆਂ ਨੂੰ BspQI ਨਾਲ ਦੁਬਾਰਾ ਕੱਟਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਈ. ਕੋਲੀ DNA: E. coli 16s rDNA-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ TaqMan qPCR ਖੋਜ ਨੇ ਦਿਖਾਇਆ ਕਿ E.coli ਜੀਨੋਮ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ≤ 0.1pg/ul.
ਹੋਸਟ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਦੀ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ:≤ 50 ਪੀਪੀਐਮ
ਬੈਕਟੀਰੀਆ ਐਂਡੋਟੌਕਸਿਨ: LAL-ਟੈਸਟ, ਚੀਨੀ ਫਾਰਮਾਕੋਪੀਆ IV 2020 ਐਡੀਸ਼ਨ, ਜੈੱਲ ਸੀਮਾ ਟੈਸਟ ਵਿਧੀ, ਆਮ ਨਿਯਮ (1143) ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ।ਬੈਕਟੀਰੀਅਲ ਐਂਡੋਟੌਕਸਿਨ ਸਮੱਗਰੀ ≤10 EU/mg ਹੋਣੀ ਚਾਹੀਦੀ ਹੈ।
ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਸਿਸਟਮ ਅਤੇ ਹਾਲਾਤ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟ | ਵਾਲੀਅਮ |
| BspQ I(10 U/μL) | 1 μL |
| ਡੀ.ਐਨ.ਏ | 1 μg |
| 10 x BspQ I ਬਫਰ | 5 μL |
| dd H2O | 50 μL ਤੱਕ |
ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਦੀਆਂ ਸਥਿਤੀਆਂ: 50 ℃, 1~ 16 ਘੰਟੇ
ਹੀਟ ਇਨਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ: 20 ਮਿੰਟ ਲਈ 80°C।
ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਅਤੇ ਸਥਿਤੀਆਂ ਮੁਕਾਬਲਤਨ ਵਧੀਆ ਪਾਚਕ ਪਾਚਨ ਪ੍ਰਭਾਵ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰ ਸਕਦੀਆਂ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਸਿਰਫ ਸੰਦਰਭ ਲਈ ਹੈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਵੇਰਵਿਆਂ ਲਈ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਨਤੀਜਿਆਂ ਨੂੰ ਵੇਖੋ।
ਉਤਪਾਦ ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨ
ਪਾਬੰਦੀ ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਪਾਚਨ, ਰੈਪਿਡ ਕਲੋਨਿੰਗ.
ਨੋਟਸ
1. ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਾਲੀਅਮ ਦਾ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ≤ 1/10 ਦੀ ਮਾਤਰਾ।
2. ਤਾਰੇ ਦੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਉਦੋਂ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜਦੋਂ ਗਲਾਈਸਰੋਲ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 5% ਤੋਂ ਵੱਧ ਹੋਵੇ।
3. ਕਲੀਵੇਜ ਗਤੀਵਿਧੀ ਉਦੋਂ ਹੋ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜਦੋਂ ਸਬਸਟਰੇਟ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੇ ਅਨੁਪਾਤ ਤੋਂ ਹੇਠਾਂ ਹੋਵੇ।
