Bst 2.0 DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ (ਗਲਾਈਸਰੋਲ ਮੁਕਤ, ਉੱਚ ਘਣਤਾ)
Bst DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ V2 ਬੇਸਿਲਸ ਸਟੀਰੋਥਰਮੋਫਿਲਸ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ I ਤੋਂ ਲਿਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ 5′→3′ DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਅਤੇ ਮਜ਼ਬੂਤ ਚੇਨ ਰਿਪਲੇਸਮੈਂਟ ਗਤੀਵਿਧੀ ਹੈ, ਪਰ ਕੋਈ 5′→3′ ਐਕਸੋਨੁਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨਹੀਂ ਹੈ।Bst DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ V2 ਸਟ੍ਰੈਂਡ-ਡਿਸਪਲੇਸਮੈਂਟ, ਆਈਸੋਥਰਮਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ LAMP (ਲੂਪ ਮੈਡੀਏਟਿਡ ਆਈਸੋਥਰਮਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ) ਅਤੇ ਤੇਜ਼ ਕ੍ਰਮ ਲਈ ਆਦਰਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਢੁਕਵਾਂ ਹੈ।ਇਹ Bst DNA ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ V2 ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਡੀਐਨਏ ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਰੋਕਣ ਦੇ ਸਮਰੱਥ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ ਇਸਨੂੰ ਚਲਾਇਆ ਜਾ ਸਕੇ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ, ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪ੍ਰਸਾਰ ਨੂੰ ਰੋਕਿਆ ਜਾ ਸਕੇ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ, ਅਤੇ ਇਹ ਸੰਸਕਰਣ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ। lyophilized ਹੋਣਾ.ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਹ ਐਲੀਵੇਟਿਡ ਤਾਪਮਾਨਾਂ 'ਤੇ ਆਪਣੀ ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਜਾਰੀ ਕਰਨ ਦੇ ਸਮਰੱਥ ਹੈ, ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਵੱਖਰੇ ਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ ਕਦਮ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰਦਾ ਹੈ।
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ
ਕੰਪੋਨੈਂਟ | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst DNA ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ V2 (ਗਲਾਈਸਰੋਲ-ਮੁਕਤ) (32U/μL) | 0.05 ਮਿ.ਲੀ | 0.25 ਮਿ.ਲੀ | 2.5 ਮਿ.ਲੀ |
10×HC Bst V2 ਬਫਰ | 1.5 ਮਿ.ਲੀ | 2×1.5 ਮਿ.ਲੀ | 3×10 ਮਿ.ਲੀ |
MgSO4 (100 ਮਿਲੀਮੀਟਰ) | 1.5 ਮਿ.ਲੀ | 2×1.5 ਮਿ.ਲੀ | 2×10 ਮਿ.ਲੀ |
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ
1.LAMP ਆਈਸੋਥਰਮਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ
2.ਡੀਐਨਏ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਸਿੰਗਲ ਡਿਸਪਲੇਸਮੈਂਟ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ
3.ਉੱਚ GC ਜੀਨ ਕ੍ਰਮ
4.ਨੈਨੋਗ੍ਰਾਮ ਪੱਧਰ ਦਾ ਡੀਐਨਏ ਕ੍ਰਮ।
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀ ਸਥਿਤੀ
0°C ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਆਵਾਜਾਈ ਅਤੇ -25°C~-15°C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਵੇ।
ਯੂਨਿਟ ਪਰਿਭਾਸ਼ਾ
ਇੱਕ ਯੂਨਿਟ ਨੂੰ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਦੀ ਮਾਤਰਾ ਵਜੋਂ ਪਰਿਭਾਸ਼ਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਜੋ 65°C 'ਤੇ 30 ਮਿੰਟਾਂ ਵਿੱਚ ਐਸਿਡ ਅਘੁਲਣਸ਼ੀਲ ਪਦਾਰਥ ਵਿੱਚ 25 nmol dNTP ਨੂੰ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰਦਾ ਹੈ।
LAMP ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | 25 μLਸਿਸਟਮ |
10×HC Bst V2 ਬਫਰ | 2.5 μL |
MgSO4 (100 ਮਿਲੀਮੀਟਰ) | 1.5 μL |
dNTPs (ਹਰੇਕ 10mm) | 3.5 μL |
SYTO™ 16 ਹਰਾ (25×)a | 1.0 μL |
ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਸ਼ਰਣb | 6 μL |
Bst DNA ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ V2 (ਗਲਾਈਸਰੋਲ-ਮੁਕਤ) (32 U/uL) | 0.25 μL |
ਟੈਂਪਲੇਟ | × μL |
ddH₂O | 25 μL ਤੱਕ |
ਨੋਟ:
1) ਏ.SYTOTM 16 ਗ੍ਰੀਨ (25×): ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਲੋੜਾਂ ਅਨੁਸਾਰ, ਹੋਰ ਰੰਗਾਂ ਨੂੰ ਬਦਲ ਵਜੋਂ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ;
2) ਬੀ.ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਕਸ: 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB ਅਤੇ ਹੋਰ ਵੌਲਯੂਮ ਨੂੰ ਮਿਲਾ ਕੇ ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।
ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਅਤੇ ਸਥਿਤੀ
1 × HC Bst V2 ਬਫਰ, ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਤਾਪਮਾਨ 60°C ਅਤੇ 65°C ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।
ਹੀਟ ਇਨਐਕਟੀਵੇਸ਼ਨ
80°C, 20 ਮਿੰਟ।