ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਇੱਕ ਕਦਮ RT-qPCR ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ
ਵਰਣਨ
ਬਿੱਲੀ ਨੰਬਰ: HCR5141A
ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਵਨ ਸਟੈਪ RT-qPCR ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ ਇੱਕ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਮਾਤਰਾਤਮਕ PCR ਕਿੱਟ ਹੈ ਜੋ ਕਿ ਆਰਐਨਏ 'ਤੇ ਆਧਾਰਿਤ ਹੈ।ਪ੍ਰਯੋਗ ਵਿੱਚ, ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਅਤੇ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਇੱਕੋ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਕੀਤੇ ਜਾਂਦੇ ਹਨ, ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਕਾਰਵਾਈ ਨੂੰ ਸਰਲ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਗੰਦਗੀ ਦੇ ਜੋਖਮ ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦੇ ਹਨ।ਬਫਰ ਅਤੇ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਸ਼ਰਣ ਦੇ ਵਿਲੱਖਣ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਨੂੰ ਇੱਕ-ਪੜਾਅ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਵਿੱਚ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਕਿੱਟ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਲਈ ਹੌਟਸਟਾਰਟ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ ਪਹਿਲੇ ਸਟ੍ਰੈਂਡ ਸੀਡੀਐਨਏ ਦੇ ਕੁਸ਼ਲ ਸੰਸਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਗਰਮੀ-ਰੋਧਕ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਵਿੱਚ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਬਫਰ, ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਸ਼ਰਣ ਆਦਿ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ, ਅਤੇ ਕਾਰਕ ਜੋ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਤੌਰ 'ਤੇ ਗੈਰ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਰੋਕਦੇ ਹਨ ਅਤੇ ਮਲਟੀਪਲ qPCR ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਦੀ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਵਧਾਉਂਦੇ ਹਨ, ਜੋ ਕਿ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਂਦੇ ਹੋਏ ਮਲਟੀਪਲ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਸਮਰੱਥ ਕਰਦੇ ਹਨ।
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ
ਨਾਮ |
1. ਲਾਇਓ-ਬਫਰ |
2. ਲਾਇਓ-ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ |
3. ਲਾਇਓ ਪ੍ਰੋਟੈਕਟੈਂਟ |
ਆਵਾਜਾਈ ਦੀ ਸਥਿਤੀਆਇਨ
A: ਲਾਇਓ-ਬਫਰ ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੈਕਟੈਂਟ: -25~-15℃, ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ 1 ਸਾਲ ਹੈ।
ਬੀ: ਲਾਇਓ-ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਸ਼ਰਣ, 2-8 ℃, ਸ਼ੈਲਫ ਲਾਈਫ 6 ਮਹੀਨੇ ਹੈ।
ਕਾਰਵਾਈ ਲਈ ਨਿਰਦੇਸ਼
1. ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ (ਉਦਾਹਰਣ ਵਜੋਂ 25μL ਲਓ)
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | ਵਾਲੀਅਮ (μL) | ਅੰਤਮ ਇਕਾਗਰਤਾ |
ਲਯੋ-ਬਫਰ | 6 | 1* |
ਲਾਇਓ-ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ | 1 | - |
ਲਯੋ—ਰੱਖਿਆ ਕਰਨ ਵਾਲਾ | 8 | - |
ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਕਸ (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
ਪੜਤਾਲ ਮਿਕਸ (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
RNA ਟੈਂਪਲੇਟ | 5 | - |
DEPC H2O | 25 ਤੱਕ | - |
2. ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਸਾਈਕਲਿੰਗ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
1) ਸਟੈਂਡਰਡ ਸਾਈਕਲਿੰਗ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਪੜਾਅ | ਤਾਪਮਾਨ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ | |
1 | ਉਲਟਾ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ | 50°Ca | 10 ਮਿੰਟ | 1 |
2 | ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਕਾਰ | 95°C | 5 ਮਿੰਟ | 1 |
3 | ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ | 95°C | 15 ਸਕਿੰਟ | 45 ਚੱਕਰ |
60°Cb | 30 ਸਕਿੰਟc |
2) ਤੇਜ਼ ਸਾਈਕਲਿੰਗ ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
| ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਪੜਾਅ | ਤਾਪਮਾਨ | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ |
1 | ਉਲਟਾ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ | 50°Ca | 2 ਮਿੰਟ | 1 |
2 | ਸ਼ੁਰੂਆਤੀ ਵਿਕਾਰ | 95°C | 2 ਸਕਿੰਟ | 1 |
3 | ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ | 95°C | 1 ਸਕਿੰਟ |
45 ਚੱਕਰ |
60°Cb | 13 ਸਕਿੰਟc |
ਨੋਟ:
a) ਉਲਟਾ ਪ੍ਰਤੀਲਿਪੀ: ਤਾਪਮਾਨ 10-15 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 42°C ਜਾਂ 50°C ਚੁਣ ਸਕਦਾ ਹੈ।
b) ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ: ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕੀਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ Tm ਮੁੱਲ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
c)ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਇਸ਼ਾਰਾ ਪ੍ਰਾਪਤੀ: ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਦੀਆਂ ਲੋੜਾਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਪ੍ਰਯੋਗਾਤਮਕ ਵਿਧੀ ਨੂੰ ਸੈਟ ਕਰੋਸਾਧਨ ਮੈਨੂਅਲ.
ਤਕਨੀਕੀ ਜਾਣਕਾਰੀ/ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾਵਾਂ
ਹਾਟ ਸਟਾਰਟ | ਬਿਲਟ-ਇਨ ਗਰਮ ਸ਼ੁਰੂਆਤ |
ਖੋਜ ਵਿਧੀ | ਪ੍ਰਾਈਮਰ-ਪ੍ਰੋਬ ਖੋਜ |
ਪੀਸੀਆਰ ਵਿਧੀ | ਇੱਕ ਕਦਮ RT-qPCR |
ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਕਿਸਮ | ਆਰ.ਐਨ.ਏ |
ਨੋਟਸ
1. ਇਹ ਉਤਪਾਦ ਸਿਰਫ਼ ਖੋਜ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਹੈ।
2. ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਆਪਣੀ ਸਿਹਤ ਅਤੇ ਸੁਰੱਖਿਆ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਲੋੜੀਂਦੇ PPE, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲੈਬ ਕੋਟ ਅਤੇ ਦਸਤਾਨੇ ਪਹਿਨੋ!