ਰਨੇਸ ਏ
Ribonuclease A(RNaseA) ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਪੌਲੀਪੇਪਟਾਇਡ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ 13.7 kDa ਦੇ ਅਣੂ ਭਾਰ ਦੇ ਨਾਲ 4 ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬਾਂਡ ਹਨ।RNase Ais ਇੱਕ ਐਂਡੋਰੀਬੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਹੈ ਜੋ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ C ਅਤੇ U ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ 'ਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਕਲੀਵੇਜ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਦੇ 5'-ਰਾਈਬੋਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਏ ਗਏ ਫਾਸਫੋਡੀਸਟਰ ਬਾਂਡ ਨੂੰ ਪਛਾਣਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਨਾਲ ਲੱਗਦੇ ਪਾਈਰੀਮੀਡੀਨ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਦੇ 3'-ਰਾਈਬੋਜ਼ 'ਤੇ ਫਾਸਫੇਟ ਸਮੂਹ ਨੂੰ ਪਛਾਣਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ 2,3'-ਸਾਈਕਲਿਕ ਫਾਸਫੇਟ ਹਾਈਡ੍ਰੋਲਾਈਜ਼ਡ3' ਤੇ 'ਨਿਊਕਲੀਓਸਾਈਡ ਫਾਸਫੇਟਸ (ਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, pG-pG-pC-pA-pG ਨੂੰ pG-pG-pCp ਅਤੇ A-PG ਬਣਾਉਣ ਲਈ RNase A ਦੁਆਰਾ ਕੱਟਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ)।RNase A ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਕਲੀਵ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਰਗਰਮ ਹੈ।ਸਿਫਾਰਿਸ਼ ਕੀਤੀ ਕੰਮਕਾਜੀ ਇਕਾਗਰਤਾ 1- 100 μ G/mL ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਦੇ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ।ਘੱਟ ਲੂਣ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (0-100 mM NaCl) ਦੀ ਵਰਤੋਂ RNA-DNA ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਬਣੀ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA, ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA, ਅਤੇ RNA ਚੇਨਾਂ ਨੂੰ ਕੱਟਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਹਾਲਾਂਕਿ, ਉੱਚ ਲੂਣ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (≥0.3 M) 'ਤੇ, RNase A ਸਿਰਫ਼ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਤੋੜਦਾ ਹੈ।
RNase A ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਦੌਰਾਨ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਤਿਆਰੀ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ DNase ਸਰਗਰਮ ਹੈ ਜਾਂ ਨਹੀਂ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਵਿੱਚ ਉਬਾਲਣ ਦੀ ਰਵਾਇਤੀ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ DNase ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ DNase ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਗਰਮੀ ਦੇ ਇਲਾਜ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ RNase ਸੁਰੱਖਿਆ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ RNA ਕ੍ਰਮ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਵਿੱਚ ਵੀ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਸਟੋਰੇਜ਼ ਹਾਲਾਤ
ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ 2 ਸਾਲਾਂ ਲਈ -25℃~-15℃ ਵਿੱਚ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
ਨਿਰਧਾਰਨ
| ਦਿੱਖ | ਪਾਊਡਰ |
| ਮਾਤਰਾ | 100mg/1g |
| ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਕਿਸਮ | ਆਰਨੇਸ ਏ |
ਹਦਾਇਤਾਂ
ਇਹ RNase A ਸਟੋਰੇਜ ਹੱਲ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਦੇ ਆਮ ਤਰੀਕਿਆਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਹੈ।ਇਹ ਵੀ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਜਾਂ ਹਵਾਲਾ ਸਾਹਿਤ ਵਿੱਚ ਰਵਾਇਤੀ ਤਰੀਕਿਆਂ ਅਨੁਸਾਰ ਹੋਰ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੁਆਰਾ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ਜਾਂ Tris-NaCl ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਸਿੱਧਾ ਘੁਲਣਾ)
1. RNase A ਸਟੋਰੇਜ ਘੋਲ ਦਾ 10 mg/mL ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ 10 mM ਸੋਡੀਅਮ ਐਸੀਟੇਟ (pH 5.2) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
2. 15 ਮਿੰਟ ਲਈ 100 ℃ 'ਤੇ ਹੀਟਿੰਗ।
3. ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਠੰਡਾ ਕਰੋ, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) ਦੀ 1/10 ਵਾਲੀਅਮ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਇਸਦੀ pH ਨੂੰ 7.4 (ਲਈ) ਵਿੱਚ ਐਡਜਸਟ ਕਰੋਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, 10 mg/mL RNase ਸਟੋਰੇਜ਼ ਹੱਲ 1 M Tris-HCl, pH7.4 ਦਾ 500 mL ਸ਼ਾਮਿਲ ਕਰੋ।
4. ਜੰਮੇ ਹੋਏ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ -20℃ 'ਤੇ ਸਬ-ਪੈਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਜੋ ਕਿ 2 ਸਾਲਾਂ ਤੱਕ ਸਥਿਰ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।
[ਨੋਟ]:
ਜਦੋਂ ਨਿਰਪੱਖ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ RNaseA ਘੋਲ ਨੂੰ ਉਬਾਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ RNase ਵਰਖਾ ਬਣ ਜਾਂਦੀ ਹੈ;ਇਸ ਨੂੰ ਘੱਟ pH 'ਤੇ ਉਬਾਲੋ, ਅਤੇ ਜੇਕਰ ਮੀਂਹ ਪੈਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਹ ਦੇਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਉਬਾਲਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਤਲਛਟ ਪਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਹਾਈ-ਸਪੀਡ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ (13000rpm) ਦੁਆਰਾ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਨੂੰ ਹਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਠੰਢੇ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ ਸਬ-ਪੈਕ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਨੋਟਸ
ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਆਪਣੀ ਸਿਹਤ ਅਤੇ ਸੁਰੱਖਿਆ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਜ਼ਰੂਰੀ PPE, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲੈਬ ਕੋਟ ਅਤੇ ਦਸਤਾਨੇ ਪਹਿਨੋ।
