RT-LAMP ਕਲਰਮੈਟ੍ਰਿਕ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ HCB5204A
ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਬਫਰ, RT-ਐਨਜ਼ਾਈਮਜ਼ ਮਿਕਸ (Bst DNA ਪੌਲੀਮੇਰੇਜ਼ ਅਤੇ ਗਰਮੀ-ਰੋਧਕ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ), ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੋਟੈਕਟੈਂਟਸ ਅਤੇ ਕ੍ਰੋਮੋਜੇਨਿਕ ਡਾਈ ਦੇ ਹਿੱਸੇ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।ਵਰਤਣ ਲਈ, ਸਿਰਫ ਬਫਰ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਅਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਨੂੰ ਮਿਲਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਿੱਚ ਜੋੜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ;ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੋਟੈਕਟੈਂਟ ਜੋੜਨਾ ਸਿੱਧਾ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਹ ਇੱਕ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਰ ਨਾਲ ਜੁੜਿਆ ਹੋਇਆ ਸੀ ਅਤੇ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ, ਅਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ 'ਤੇ ਸਿਰਫ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਅਤੇ ਟੈਂਪਲੇਟ ਸ਼ਾਮਲ ਕੀਤੇ ਗਏ ਸਨ।ਇਹ ਕਿੱਟ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਦੀ ਇੱਕ ਤੇਜ਼, ਸਪਸ਼ਟ ਵਿਜ਼ੂਅਲ ਖੋਜ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਜੋ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਲਾਲ ਵਿੱਚ ਦਰਸਾਈ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਅਤੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪੀਲੇ ਵਿੱਚ ਤਬਦੀਲੀ ਦੁਆਰਾ ਦਰਸਾਈ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
ਕੰਪੋਨੈਂਟ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟ | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| ਲੂਪ-ਮੀਡੀਏਟਿਡ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਬਫਰ (ਡਾਈ ਨਾਲ) | 0.96 ਮਿ.ਲੀ | 4.80 mL×2 | 9.60 mL×10 |
| RT-ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ | 270 μL | 2.70 ਮਿ.ਲੀ | 2.70 mL×10 |
| ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੋਟੈਕਟਰ | 0.96 mL×2 | 9.60 mL×2 | 9.60 mL×20 |
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ
ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਆਰਐਨਏ ਆਈਸੋਥਰਮਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ।
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ
-25~ -15℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤੀ, ਸੁੱਕੀ ਬਰਫ਼ ਨਾਲ ਟ੍ਰਾਂਸਪੋਰਟ ਕੀਤਾ ਗਿਆ।ਵਾਰ-ਵਾਰ ਫ੍ਰੀਜ਼-ਪੰਘਣ ਤੋਂ ਬਚੋ, ਉਤਪਾਦ 12 ਮਹੀਨਿਆਂ ਲਈ ਵੈਧ ਹੈ।
ਪ੍ਰੋਟੋਕੋਲ
1.ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਵਰਤੇ ਜਾਣ ਵਾਲੇ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਬਫਰ ਨੂੰ ਪਿਘਲਾਓ।ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਰਲਾਉਣ ਲਈ ਟਿਊਬਾਂ ਨੂੰ ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਜਾਂ ਉਲਟਾਓ, ਫਿਰ ਟਿਊਬ ਦੇ ਹੇਠਾਂ ਤਰਲ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਲਈ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।
2.ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਤਿਆਰੀ.ਇਹ ਰੀਐਜੈਂਟ ਦੋ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ, ਤਰਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਅਤੇ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਸਿਸਟਮ ਮਿਸ਼ਰਣ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
1) ਤਰਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਤਿਆਰ ਕਰੋ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟ | ਵਾਲੀਅਮ |
| ਲੂਪ-ਮੀਡੀਏਟਿਡ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਬਫਰ (ਡਾਈ ਨਾਲ) | 10 μL |
| RT-ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ | 2.8 μL |
| 10 × ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਕਸa | 5 μL |
| ਟੈਂਪਲੇਟ DNA/RNA b | × μL |
| ਨਿਊਕਲੀਜ਼-ਮੁਕਤ ਪਾਣੀ | 50 μL ਤੱਕ |
2) Lyophilization ਸਿਸਟਮ ਮਿਸ਼ਰਣ
① ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਮਿਸ਼ਰਣ ਤਿਆਰ ਕਰੋ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟ | ਵਾਲੀਅਮ |
| ਲੂਪ-ਮੀਡੀਏਟਿਡ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਬਫਰ (ਡਾਈ ਨਾਲ) | 10 μL |
| ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ਡ ਪ੍ਰੋਟੈਕਟਰ | 20 μL |
| RT-ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ | 2.8 μL |
| ਨਿਊਕਲੀਜ਼-ਮੁਕਤ ਪਾਣੀ | 50 μL ਤੱਕ |
② ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ: ਤਿਆਰ ਕੀਤੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ 50μL ਸਿਸਟਮ ਵਿੱਚ ਲਾਇਓਫਿਲਾਈਜ਼ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਸੀ
③ ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਮਿਸ਼ਰਣ ਤਿਆਰ ਕਰੋ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟ | ਵਾਲੀਅਮ |
| Lyophilized ਮਿਸ਼ਰਣ | 1 ਟੁਕੜਾ |
| 10 × ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਕਸa | 5 μL |
| ਟੈਂਪਲੇਟ DNA/RNA b | × μL |
| ਨਿਊਕਲੀਜ਼-ਮੁਕਤ ਪਾਣੀ | 50 μL ਤੱਕ |
ਨੋਟ:
1) ਏ.10×ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਕਸ : 16 μM FIP/BIP, 2 μM F3/B3, 4 μM ਲੂਪ F/B;
2) ਬੀ.ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਟੈਂਪਲ ਲਈ ਡੀਈਪੀਸੀ (ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ) ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
1.30-45 ਮਿੰਟਾਂ ਲਈ 65 ਡਿਗਰੀ ਸੈਲਸੀਅਸ 'ਤੇ ਪ੍ਰਫੁੱਲਤ ਕਰੋ, ਜਿਸ ਨੂੰ ਰੰਗ ਬਦਲਣ ਦੇ ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਦੇ ਸਮੇਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਉਚਿਤ ਢੰਗ ਨਾਲ ਵਧਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
2.ਨੰਗੀ ਅੱਖ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ, ਪੀਲਾ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਸੀ ਅਤੇ ਲਾਲ ਨਕਾਰਾਤਮਕ ਸੀ.
ਨੋਟਸ
1.ਲੂਣ ਬਫਰ ਟਿਊਬ ਦੇ ਤਲ ਵਿੱਚ ਦਿਖਾਈ ਦੇ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਉਣ ਲਈ ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਵੌਰਟੈਕਸ ਜਾਂ ਟਿਊਬਾਂ ਨੂੰ ਕਈ ਵਾਰ ਉਲਟਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
2.ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦਾ ਤਾਪਮਾਨ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੀ ਸਥਿਤੀ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ 62 ℃ ਅਤੇ 68 ℃ ਵਿਚਕਾਰ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
3.ਪੈਕ ਕੀਤੇ ਰੀਐਜੈਂਟਸ ਨੂੰ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ ਹਵਾ ਦੇ ਸੰਪਰਕ ਵਿੱਚ ਨਹੀਂ ਆਉਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
4.ਲਾਲ ਅਤੇ ਪੀਲੇ ਰੰਗ ਦੀ ਵਿਗਾੜ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੇ pH ਤਬਦੀਲੀ 'ਤੇ ਨਿਰਭਰ ਕਰਦੀ ਹੈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ddH ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਲਈ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੇ ਗਏ ਟ੍ਰਿਸ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਸਟੋਰੇਜ ਘੋਲ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਨਾ ਕਰੋ।2O ਸਟੋਰ ਕੀਤੇ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ;
5.ਪ੍ਰਯੋਗ ਨੂੰ ਪ੍ਰਮਾਣਿਤ ਕੀਤਾ ਜਾਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ, ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਦੀ ਤਿਆਰੀ, ਲਿਓਫਿਲਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਾ ਪ੍ਰੋਸੈਸਿੰਗ ਅਤੇ ਨਮੂਨਾ ਜੋੜਨ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ;
6.ਗੰਦਗੀ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ, ਇੱਕ ਅਲਟਰਾ-ਕਲੀਨ ਬੈਂਚ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ ਨੂੰ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ, ਦੂਜੇ ਵਿੱਚ ਝੂਠੇ ਸਕਾਰਾਤਮਕ ਦਖਲ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਕਮਰੇ ਦੇ ਫਿਊਮ ਹੁੱਡ ਵਿੱਚ ਟੈਂਪਲੇਟ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।
