ਵਾਇਰਲ DNA/RNA ਐਕਸਟਰੈਕਸ਼ਨ ਕਿੱਟ
ਇਹ ਕਿੱਟ ਨਮੂਨੇ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਨੈਸੋਫੈਰਨਜੀਲ ਸਵੈਬ, ਵਾਤਾਵਰਣਕ ਸਵੈਬ, ਸੈੱਲ ਕਲਚਰ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟਸ, ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਹੋਮੋਜਨੇਟ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟਸ ਤੋਂ ਉੱਚ-ਸ਼ੁੱਧਤਾ ਵਾਲੇ ਵਾਇਰਲ DNA/RNA ਦੇ ਤੇਜ਼ੀ ਨਾਲ ਕੱਢਣ ਲਈ ਢੁਕਵੀਂ ਹੈ।ਕਿੱਟ ਸਿਲਿਕਾ ਝਿੱਲੀ ਸ਼ੁੱਧੀਕਰਨ ਤਕਨਾਲੋਜੀ 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਹੈ ਜੋ ਉੱਚ ਗੁਣਵੱਤਾ ਦੇ ਵਾਇਰਲ ਡੀਐਨਏ/ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਕੱਢਣ ਲਈ ਫਿਨੋਲ/ਕਲੋਰੋਫਾਰਮ ਜੈਵਿਕ ਘੋਲਨ ਜਾਂ ਸਮਾਂ-ਬਰਬਾਦ ਅਲਕੋਹਲ ਵਰਖਾ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਜ਼ਰੂਰਤ ਨੂੰ ਖਤਮ ਕਰਦੀ ਹੈ।ਪ੍ਰਾਪਤ ਕੀਤੇ ਗਏ ਨਿਊਕਲੀਕ ਐਸਿਡ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਤੋਂ ਮੁਕਤ ਹਨ ਅਤੇ ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ, ਪੀਸੀਆਰ, ਆਰਟੀ-ਪੀਸੀਆਰ, ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ, ਅਗਲੀ ਪੀੜ੍ਹੀ ਦੇ ਕ੍ਰਮ (ਐਨਜੀਐਸ), ਅਤੇ ਉੱਤਰੀ ਧੱਬੇ ਵਰਗੇ ਡਾਊਨਸਟ੍ਰੀਮ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਤਿਆਰ ਹਨ।
ਸਟੋਰੇਜ਼ ਹਾਲਾਤ
15 ~ 25℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਟ੍ਰਾਂਸਪੋਰਟ ਕਰੋ
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | 100RXNS |
| ਬਫਰ VL | 50 ਮਿ.ਲੀ |
| ਬਫਰ RW | 120 ਮਿ.ਲੀ |
| RNase-ਮੁਕਤ ddH2 O | 6 ਮਿ.ਲੀ |
| FastPure RNA ਕਾਲਮ | 100 |
| ਸੰਗ੍ਰਹਿ ਟਿਊਬਾਂ (2ml) | 100 |
| RNase-ਮੁਕਤ ਕੁਲੈਕਸ਼ਨ ਟਿਊਬਾਂ (1.5ml) | 100 |
ਬਫਰ VL:ਲਿਸਿਸ ਅਤੇ ਬਾਈਡਿੰਗ ਲਈ ਵਾਤਾਵਰਣ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕਰੋ।
ਬਫਰ RW:ਬਚੇ ਹੋਏ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਤੇ ਹੋਰ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਨੂੰ ਹਟਾਓ।
RNase-ਮੁਕਤ ddH2O:ਸਪਿੱਨ ਕਾਲਮ ਵਿੱਚ ਝਿੱਲੀ ਤੋਂ ਐਲੂਟ ਡੀਐਨਏ/ਆਰਐਨਏ।
FastPure RNA ਕਾਲਮ:ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ DNA/RNA ਨੂੰ ਸੋਖ ਲੈਂਦਾ ਹੈ।
ਸੰਗ੍ਰਹਿ ਟਿਊਬਾਂ 2 ਮਿ.ਲੀ.ਫਿਲਟਰੇਟ ਇਕੱਠਾ ਕਰੋ.
RNase-ਮੁਕਤ ਕੁਲੈਕਸ਼ਨ ਟਿਊਬਾਂ 1.5 ਮਿ.ਲੀ.:DNA/RNA ਇਕੱਠਾ ਕਰੋ।
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ
ਨੈਸੋਫੈਰਨਜੀਅਲ ਸਵੈਬਜ਼, ਵਾਤਾਵਰਣਕ ਸਵੈਬ, ਸੈੱਲ ਕਲਚਰ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟਸ, ਅਤੇ ਟਿਸ਼ੂ ਹੋਮੋਜਨੇਟ ਸੁਪਰਨੇਟੈਂਟਸ।
ਸਵੈ-ਤਿਆਰ ਮੈਟਰials
RNase-ਮੁਕਤ ਪਾਈਪੇਟ ਸੁਝਾਅ, 1.5 ml RNase-ਮੁਕਤ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਜ ਟਿਊਬ, ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ, ਵੌਰਟੈਕਸ ਮਿਕਸਰ, ਅਤੇ ਪਾਈਪੇਟਸ।
ਪ੍ਰਯੋਗ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ
ਬਾਇਓਸੇਫਟੀ ਕੈਬਿਨੇਟ ਵਿੱਚ ਹੇਠਾਂ ਦਿੱਤੇ ਸਾਰੇ ਕਦਮਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰੋ।
1. ਨਮੂਨੇ ਦੇ 200 μl ਨੂੰ ਇੱਕ RNase-ਮੁਕਤ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ (ਨਾਕਾਫ਼ੀ ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਸਥਿਤੀ ਵਿੱਚ PBS ਜਾਂ 0.9% NaCl ਨਾਲ ਬਣਾਓ), 500 μl ਬਫਰ VL ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, 15 - 30 ਸਕਿੰਟ ਲਈ ਵੋਰਟੈਕਸਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ, ਅਤੇ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਜ ਟਿਊਬ ਦੇ ਤਲ 'ਤੇ ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਇਕੱਠਾ ਕਰਨ ਲਈ ਸੰਖੇਪ.
2. ਇੱਕ ਸੰਗ੍ਰਹਿ ਟਿਊਬਾਂ ਵਿੱਚ ਫਾਸਟਪਿਊਰ ਆਰਐਨਏ ਕਾਲਮ 2 ਮਿ.ਲੀ.ਮਿਸ਼ਰਣ ਨੂੰ ਪੜਾਅ 1 ਤੋਂ ਫਾਸਟਪਿਊਰ ਆਰਐਨਏ ਕਾਲਮਾਂ ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ, 1 ਮਿੰਟ ਲਈ 12,000 rpm (13,400 × g) 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਫਿਲਟਰੇਟ ਨੂੰ ਰੱਦ ਕਰੋ।
3. FastPure RNA ਕਾਲਮਾਂ ਵਿੱਚ 600 μl ਬਫਰ RW ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, 30 ਸਕਿੰਟ ਲਈ 12,000 rpm (13,400 × g) 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਫਿਲਟਰੇਟ ਨੂੰ ਰੱਦ ਕਰੋ।
4. ਕਦਮ 3 ਦੁਹਰਾਓ।
5. ਖਾਲੀ ਕਾਲਮ ਨੂੰ 2 ਮਿੰਟ ਲਈ 12,000 rpm (13,400 × g) 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।
6. FastPure RNA ਕਾਲਮਾਂ ਨੂੰ ਧਿਆਨ ਨਾਲ ਇੱਕ ਨਵੀਂ RNase-ਮੁਕਤ ਕੁਲੈਕਸ਼ਨ ਟਿਊਬਾਂ 1.5 ml (ਕਿੱਟ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੀ ਗਈ) ਵਿੱਚ ਟ੍ਰਾਂਸਫਰ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਕਾਲਮ ਨੂੰ ਛੂਹਣ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਝਿੱਲੀ ਦੇ ਕੇਂਦਰ ਵਿੱਚ 30 - 50 μl RNase-ਮੁਕਤ ddH2O ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ।ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ 1 ਮਿੰਟ ਲਈ ਖੜ੍ਹੇ ਹੋਣ ਦਿਓ ਅਤੇ 1 ਮਿੰਟ ਲਈ 12,000 rpm (13,400 × g) 'ਤੇ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਰੋ।
7. FastPure RNA ਕਾਲਮਾਂ ਨੂੰ ਰੱਦ ਕਰੋ।ਡੀਐਨਏ/ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਅਗਲੀਆਂ ਜਾਂਚਾਂ ਲਈ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜਾਂ ਥੋੜ੍ਹੇ ਸਮੇਂ ਲਈ -30~ -15°C ਜਾਂ ਲੰਬੇ ਸਮੇਂ ਲਈ -85~-65°C 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਨੋਟਸ
ਸਿਰਫ਼ ਖੋਜ ਲਈ ਵਰਤੋਂ।ਡਾਇਗਨੌਸਟਿਕ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਵਿੱਚ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਨਹੀਂ।
1. ਨਮੂਨਿਆਂ ਨੂੰ ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਲਈ ਪਹਿਲਾਂ ਤੋਂ ਹੀ ਸੰਤੁਲਿਤ ਕਰੋ।
2. ਵਾਇਰਸ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਛੂਤ ਵਾਲੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ।ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਓ ਕਿ ਪ੍ਰਯੋਗ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਸਾਰੀਆਂ ਲੋੜੀਂਦੀਆਂ ਸੁਰੱਖਿਆ ਸਾਵਧਾਨੀ ਵਰਤ ਲਈਆਂ ਗਈਆਂ ਹਨ।
3. ਨਮੂਨੇ ਨੂੰ ਵਾਰ-ਵਾਰ ਜੰਮਣ ਅਤੇ ਪਿਘਲਾਉਣ ਤੋਂ ਬਚੋ, ਕਿਉਂਕਿ ਇਸ ਨਾਲ ਐਕਸਟਰੈਕਟ ਕੀਤੇ ਵਾਇਰਲ DNA/RNA ਦੀ ਪੈਦਾਵਾਰ ਘਟ ਸਕਦੀ ਹੈ ਜਾਂ ਘਟ ਸਕਦੀ ਹੈ।
4. ਸਵੈ-ਤਿਆਰ ਸਾਜ਼ੋ-ਸਾਮਾਨ ਵਿੱਚ RNase-ਮੁਕਤ ਪਾਈਪੇਟ ਟਿਪਸ, 1.5 ml RNase-ਮੁਕਤ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਟਿਊਬ, ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ, ਵੌਰਟੈਕਸ ਮਿਕਸਰ, ਅਤੇ ਪਾਈਪੇਟਸ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।
5. ਕਿੱਟ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਸਮੇਂ, ਇੱਕ ਲੈਬ ਕੋਟ, ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਲੈਟੇਕਸ ਦਸਤਾਨੇ, ਅਤੇ ਇੱਕ ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਮਾਸਕ ਪਹਿਨੋ ਅਤੇ RNase ਗੰਦਗੀ ਦੇ ਜੋਖਮ ਨੂੰ ਘੱਟ ਕਰਨ ਲਈ RNase-ਮੁਕਤ ਖਪਤ ਵਾਲੀਆਂ ਚੀਜ਼ਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
6. ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ 'ਤੇ ਸਾਰੇ ਕਦਮਾਂ ਨੂੰ ਪੂਰਾ ਕਰੋ ਜਦੋਂ ਤੱਕ ਕਿ ਹੋਰ ਨਿਰਧਾਰਿਤ ਨਾ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੋਵੇ।
ਮਕੈਨਿਜ਼ਮ ਅਤੇ ਵਰਕਫਲੋ
