ਇੱਕ ਕਦਮ RT-qPCR ਪੜਤਾਲ ਕਿੱਟ
ਵਰਣਨ
ਵਨ ਸਟੈਪ qRT-PCR ਪ੍ਰੋਬ ਕਿੱਟ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ qPCR ਲਈ ਤਿਆਰ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ ਜੋ ਸਿੱਧੇ ਤੌਰ 'ਤੇ ਆਰਐਨਏ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਵਾਇਰਸ ਆਰਐਨਏ) ਨੂੰ ਟੈਂਪਲੇਟ ਵਜੋਂ ਵਰਤਦੀ ਹੈ।ਜੀਨ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਪ੍ਰਾਈਮਰ (GSP) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਦੇ ਹੋਏ, ਰਿਵਰਸ ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਸ਼ਨ ਅਤੇ qPCR ਨੂੰ ਇੱਕ ਟਿਊਬ ਵਿੱਚ ਪੂਰਾ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਪਾਈਪਟਿੰਗ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆਵਾਂ ਅਤੇ ਗੰਦਗੀ ਦੇ ਜੋਖਮ ਨੂੰ ਮਹੱਤਵਪੂਰਨ ਤੌਰ 'ਤੇ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ।qRT-PCR ਦੀ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਅਤੇ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਨੂੰ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕੀਤੇ ਬਿਨਾਂ ਇਸਨੂੰ 55℃ 'ਤੇ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਵਨ ਸਟੈਪ qRT-PCR ਪ੍ਰੋਬ ਕਿੱਟ ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਦਾਨ ਕੀਤੀ ਗਈ ਹੈ।5 × ਵਨ ਸਟੈਪ ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਇੱਕ ਅਨੁਕੂਲਿਤ ਬਫਰ ਅਤੇ dNTP/dUTP ਮਿਕਸ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਇਹ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਲੇਬਲ ਵਾਲੀਆਂ ਪੜਤਾਲਾਂ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ TaqMan) 'ਤੇ ਅਧਾਰਤ ਉੱਚ-ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਖੋਜ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਲਈ ਢੁਕਵਾਂ ਹੈ।
RT-qPCR ਦੇ ਮੂਲ ਸਿਧਾਂਤ
ਨਿਰਧਾਰਨ
ਟੈਸਟ ਆਈਟਮਾਂ | ਨਿਰਧਾਰਨ | ਨਤੀਜਾ |
(SDS PAGE) ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਸਟਾਕ ਦੀ ਸ਼ੁੱਧਤਾ (SDS PAGE) | ≥95% | ਪਾਸ |
ਐਂਡੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਗਤੀਵਿਧੀ | ਪਤਾ ਨਹੀਂ ਲੱਗਾ | ਪਾਸ |
Exodulease ਗਤੀਵਿਧੀ | ਪਤਾ ਨਹੀਂ ਲੱਗਾ | ਪਾਸ |
Rnase ਗਤੀਵਿਧੀ | ਪਤਾ ਨਹੀਂ ਲੱਗਾ | ਪਾਸ |
ਬਕਾਇਆ ਈ.ਕੋਲੀ ਡੀ.ਐਨ.ਏ | 1 ਕਾਪੀਆਂ/60 | ਪਾਸ |
ਫੰਕਸ਼ਨਲ ਅਸੇ-ਸਿਸਟਮ | 90%≤110% | ਪਾਸ |
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ
ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | 100rxns | 1,000 ਰੁ | 5,000 rxns |
RNase-ਮੁਕਤ ddH2O | 2*1 ਮਿ.ਲੀ | 20 ਮਿ.ਲੀ | 100 ਮਿ.ਲੀ |
5*ਇਕ ਕਦਮ ਮਿਸ਼ਰਣ | 600μl | 6*1 ਮਿ.ਲੀ | 30 ਮਿ.ਲੀ |
ਇੱਕ ਕਦਮ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਸ਼ਰਣ | 150μl | 2*750μl | 7.5 ਮਿ.ਲੀ |
50* ROX ਹਵਾਲਾ Dye 1 | 60μl | 600μl | 3*1 ਮਿ.ਲੀ |
50* ROX ਹਵਾਲਾ Dye 2 | 60μl | 600μl | 3*1 ਮਿ.ਲੀ |
aਵਨ-ਸਟੈਪ ਬਫਰ ਵਿੱਚ dNTP ਮਿਕਸ ਅਤੇ Mg2+ ਸ਼ਾਮਲ ਹਨ।
ਬੀ.ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਮੁੱਖ ਤੌਰ 'ਤੇ ਉਲਟਾ ਹੁੰਦਾ ਹੈ
ਟ੍ਰਾਂਸਕ੍ਰਿਪਟੇਜ, ਹੌਟ ਸਟਾਰਟ ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ (ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਸੋਧ) ਅਤੇ ਆਰਨੇਜ਼ ਇਨਿਹਿਬਟਰ।
c.ਵੱਖ-ਵੱਖ ਖੂਹਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਫਲੋਰੋਸੀਨ ਸਾਈਨਲ ਦੀ ਗਲਤੀ ਨੂੰ ਠੀਕ ਕਰਨ ਲਈ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ।
d.ROX: ਤੁਹਾਨੂੰ ਟੈਸਟਿੰਗ ਸਾਧਨ ਦੇ ਮਾਡਲ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਕੈਲੀਬ੍ਰੇਸ਼ਨ ਦੀ ਚੋਣ ਕਰਨ ਦੀ ਲੋੜ ਹੈ।
ਐਪਲੀਕੇਸ਼ਨਾਂ
QPCR ਖੋਜ
ਸ਼ਿਪਿੰਗ ਅਤੇ ਸਟੋਰੇਜ਼
ਸ਼ਿਪਿੰਗ:ਆਈਸ ਪੈਕ
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ:-20 ℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕਰੋ.
ਸ਼ੀਫ ਲਾਈਫ:18 ਮਹੀਨੇ