ਰਨੇਸ ਏ
Ribonuclease A (RNaseA) ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ ਪੌਲੀਪੇਪਟਾਇਡ ਹੈ ਜਿਸ ਵਿੱਚ ਲਗਭਗ 13.7 kDa ਦੇ ਅਣੂ ਭਾਰ ਦੇ ਨਾਲ 4 ਡਾਈਸਲਫਾਈਡ ਬਾਂਡ ਹਨ।RNase A ਇੱਕ ਐਂਡੋਰੀਬੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਹੈ ਜੋ ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ C ਅਤੇ U ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ 'ਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਘਟਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਖਾਸ ਤੌਰ 'ਤੇ, ਕਲੀਵੇਜ ਇੱਕ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਦੇ 5′-ਰਾਈਬੋਜ਼ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਏ ਗਏ ਫਾਸਫੋਡੀਸਟਰ ਬਾਂਡ ਨੂੰ ਪਛਾਣਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਨਾਲ ਲੱਗਦੇ ਪਾਈਰੀਮੀਡੀਨ ਨਿਊਕਲੀਓਟਾਈਡ ਦੇ 3′-ਰਾਈਬੋਜ਼ 'ਤੇ ਫਾਸਫੇਟ ਸਮੂਹ ਦੁਆਰਾ ਬਣਾਇਆ ਗਿਆ ਹੈ, ਤਾਂ ਜੋ 2, 3′-ਸਾਈਕਲਿਕ ਕੋਰਪੋਲੀਜ਼ਾਈਡਿੰਗ 3′-ਸਾਈਕਲਿਕ ਫਾਸਫੋਲੀਜ਼ਾਈਡ 3′-ਰਾਈਬੋਜ਼ 'ਤੇ ਹੋਵੇ। ′ਨਿਊਕਲੀਓਸਾਈਡ ਫਾਸਫੇਟਸ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ pG-pG-pC-pA-pG ਨੂੰ pG-pG-pCp ਅਤੇ A-PG ਬਣਾਉਣ ਲਈ RNase A ਦੁਆਰਾ ਕਲੀਵ ਕੀਤਾ ਜਾਂਦਾ ਹੈ)।RNase A ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਕਲੀਵ ਕਰਨ ਵਿੱਚ ਸਭ ਤੋਂ ਵੱਧ ਸਰਗਰਮ ਹੈ।ਸਿਫ਼ਾਰਿਸ਼ ਕੀਤੀ ਕੰਮਕਾਜੀ ਇਕਾਗਰਤਾ 1-100μG/mL ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀਆਂ ਦੇ ਅਨੁਕੂਲ ਹੈ।ਘੱਟ ਲੂਣ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (0-100 mM NaCl) ਦੀ ਵਰਤੋਂ RNA-DNA ਹਾਈਬ੍ਰਿਡਾਈਜ਼ੇਸ਼ਨ ਦੁਆਰਾ ਬਣੀ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA, ਡਬਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA, ਅਤੇ RNA ਚੇਨਾਂ ਨੂੰ ਕੱਟਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਹਾਲਾਂਕਿ, ਉੱਚ ਲੂਣ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ (≥0.3 M), RNase A ਸਿਰਫ਼ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸਿੰਗਲ-ਸਟ੍ਰੈਂਡਡ RNA ਨੂੰ ਤੋੜਦਾ ਹੈ।
RNase A ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਪਲਾਜ਼ਮੀਡ ਡੀਐਨਏ ਜਾਂ ਜੀਨੋਮਿਕ ਡੀਐਨਏ ਦੀ ਤਿਆਰੀ ਦੌਰਾਨ ਆਰਐਨਏ ਨੂੰ ਹਟਾਉਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ। ਤਿਆਰੀ ਦੀ ਪ੍ਰਕਿਰਿਆ ਦੌਰਾਨ DNase ਸਰਗਰਮ ਹੈ ਜਾਂ ਨਹੀਂ, ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਨੂੰ ਆਸਾਨੀ ਨਾਲ ਪ੍ਰਭਾਵਿਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਪਾਣੀ ਦੇ ਇਸ਼ਨਾਨ ਵਿੱਚ ਉਬਾਲਣ ਦੀ ਰਵਾਇਤੀ ਵਿਧੀ ਦੀ ਵਰਤੋਂ DNase ਗਤੀਵਿਧੀ ਨੂੰ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਕਰਨ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ DNase ਅਤੇ ਪ੍ਰੋਟੀਜ਼ ਨਹੀਂ ਹੈ, ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਗਰਮੀ ਦੇ ਇਲਾਜ ਦੀ ਲੋੜ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਇਸ ਤੋਂ ਇਲਾਵਾ, ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਅਣੂ ਜੀਵ ਵਿਗਿਆਨ ਪ੍ਰਯੋਗਾਂ ਜਿਵੇਂ ਕਿ RNase ਸੁਰੱਖਿਆ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਅਤੇ RNA ਕ੍ਰਮ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਵਿੱਚ ਵੀ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ
ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ -25～-15℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, 2 ਸਾਲਾਂ ਲਈ ਵੈਧ।
ਹਦਾਇਤਾਂ
ਇਹ RNase A ਸਟੋਰੇਜ ਹੱਲ ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਦੇ ਆਮ ਤਰੀਕਿਆਂ ਵਿੱਚੋਂ ਇੱਕ ਹੈ।ਦੁਆਰਾ ਵੀ ਤਿਆਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈਪ੍ਰਯੋਗਸ਼ਾਲਾ ਜਾਂ ਹਵਾਲਾ ਸਾਹਿਤ ਵਿੱਚ ਰਵਾਇਤੀ ਤਰੀਕਿਆਂ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਹੋਰ ਤਰੀਕੇ (ਜਿਵੇਂ ਕਿ10 mM Tris-HCl, pH 7.5 ਜਾਂ Tris-NaCl ਘੋਲ ਵਿੱਚ ਸਿੱਧਾ ਘੁਲਣਾ)
1. RNase A ਸਟੋਰੇਜ ਘੋਲ ਦਾ 10 mg/mL ਤਿਆਰ ਕਰਨ ਲਈ 10 mM ਸੋਡੀਅਮ ਐਸੀਟੇਟ (pH 5.2) ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ।
2. 15 ਮਿੰਟ ਲਈ 100 ℃ 'ਤੇ ਹੀਟਿੰਗ
3. ਕਮਰੇ ਦੇ ਤਾਪਮਾਨ ਨੂੰ ਠੰਡਾ ਕਰੋ, 1 M Tris-HCl (pH 7.4) ਦੀ 1/10 ਵਾਲੀਅਮ ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ, ਇਸਦੀ pH ਨੂੰ 7.4 (ਲਈ) ਵਿੱਚ ਐਡਜਸਟ ਕਰੋਉਦਾਹਰਨ ਲਈ, 500 ml 10g/ml RNase ਸਟੋਰੇਜ਼ ਹੱਲ 1M Tris-HCL, PH7.4 ਸ਼ਾਮਲ ਕਰੋ)
4. ਜੰਮੇ ਹੋਏ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ -20℃ 'ਤੇ ਸਬ-ਪੈਕ ਕੀਤਾ ਗਿਆ, ਜੋ ਕਿ 2 ਸਾਲਾਂ ਤੱਕ ਸਥਿਰ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।
[ਨੋਟ]: ਜਦੋਂ ਨਿਰਪੱਖ ਹਾਲਤਾਂ ਵਿੱਚ RNaseA ਘੋਲ ਨੂੰ ਉਬਾਲਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ RNase ਵਰਖਾ ਬਣ ਜਾਂਦੀ ਹੈ;ਇਸ ਨੂੰ ਘੱਟ pH 'ਤੇ ਉਬਾਲੋ, ਅਤੇ ਜੇਕਰ ਮੀਂਹ ਪੈਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਇਹ ਦੇਖਿਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਜੋ ਕਿ ਪ੍ਰੋਟੀਨ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਦੀ ਮੌਜੂਦਗੀ ਕਾਰਨ ਹੋ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਉਬਾਲਣ ਤੋਂ ਬਾਅਦ ਤਲਛਟ ਪਾਇਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ, ਤਾਂ ਹਾਈ-ਸਪੀਡ ਸੈਂਟਰੀਫਿਊਗੇਸ਼ਨ (13000rpm) ਦੁਆਰਾ ਅਸ਼ੁੱਧੀਆਂ ਨੂੰ ਹਟਾਇਆ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਫਿਰ ਠੰਢੇ ਸਟੋਰੇਜ ਲਈ ਸਬ-ਪੈਕ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਜਾਣਕਾਰੀ
| ਸਮਾਨਾਰਥੀ | ਰਿਬੋਨੁਕਲੀਜ਼ I;ਪੈਨਕ੍ਰੀਆਟਿਕ ਰਿਬੋਨਿਊਕਲੀਜ਼;ਰਿਬੋਨਿਊਕਲੀਜ਼ 3'-pyrimidnooligonucleotidohydrolase;ਰਨੇਸ ਏ;ਐਂਡੋਰੀਬੋਨੁਲਸਿਸ ਆਈ |
| CAS ਨੰ. | 9001-99-4 |
| ਦਿੱਖ | ਚਿੱਟਾ lyophilized ਪਾਊਡਰ |
| ਅਣੂ ਭਾਰ | ~ 13.7kDa (ਐਮੀਨੋ ਐਸਿਡ ਕ੍ਰਮ) |
| Ph ਮੁੱਲ | 7.6 (ਸਰਗਰਮੀ ਸੀਮਾ 6-10) |
| ਅਨੁਕੂਲ ਤਾਪਮਾਨ | 60℃ (ਸਰਗਰਮੀ ਸੀਮਾ 15-70℃) |
| ਐਕਟੀਵੇਟਿੰਗ ਏਜੰਟ | Na2+.ਕੇ+ |
| ਰੋਕਣ ਵਾਲਾ | Rnase ਇਨਿਹਿਬਟਰ |
| ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲਤਾ ਵਿਧੀ | ਹੀਟਿੰਗ ਦੁਆਰਾ ਅਕਿਰਿਆਸ਼ੀਲ ਨਹੀਂ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ, ਇਸ ਨੂੰ ਸੈਂਟਰਿਫਿਊਜ ਕਾਲਮ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਲਾਹ ਦਿੱਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ |
| ਮੂਲ | ਬੋਵਾਈਨ |
| ਘੁਲਣਸ਼ੀਲਤਾ | ਪਾਣੀ ਵਿੱਚ ਘੁਲਣਸ਼ੀਲ (10mg/ml) |
| ਸੁੱਕੇ 'ਤੇ ਨੁਕਸਾਨ | ≤5.0% |
| ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਗਤੀਵਿਧੀ | ≥60 ਕੁਨਿਟਜ਼ ਯੂਨਿਟ/mg |
| ਆਈਸੋਇਲੈਕਟ੍ਰਿਕ ਪੁਆਇੰਟ | 9.6 |
ਨੋਟਸ
ਤੁਹਾਡੀ ਸੁਰੱਖਿਆ ਅਤੇ ਸਿਹਤ ਲਈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਆਪਰੇਸ਼ਨ ਲਈ ਲੈਬ ਕੋਟ ਅਤੇ ਡਿਸਪੋਸੇਬਲ ਦਸਤਾਨੇ ਪਾਓ।
