ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ qPCR ਪ੍ਰੋਬ ਪ੍ਰੀਮਿਕਸ
ਬਿੱਲੀ ਨੰਬਰ: HCB5051A
ਟਾਕਮੈਨ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ qPCR ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ (ਡਾਈ ਬੇਸਡ) ਉੱਚ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਦੁਆਰਾ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਵਾਲੇ 2 × ਰੀਅਲ-ਟਾਈਮ ਮਾਤਰਾਤਮਕ PCR ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਲਈ ਇੱਕ ਪ੍ਰੀ-ਸੋਲਿਊਸ਼ਨ ਹੈ, ਜਿਸਦਾ ਰੰਗ ਨੀਲਾ ਹੈ, ਅਤੇ ਨਮੂਨਾ ਜੋੜਨ ਦਾ ਪ੍ਰਭਾਵ ਹੈ।ਇਹ ਉਤਪਾਦ ਇੱਕ 2× ਮਿਕਸ ਪ੍ਰੀ-ਮਿਕਸਡ ਰੀਐਜੈਂਟ ਹੈ ਜੋ ਇੱਕ ਸਿੰਗਲ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਵਿੱਚ ਚਾਰ ਫਲੋਰੋਸੈਂਟ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਪੀਸੀਆਰ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆਵਾਂ ਨੂੰ ਸਮਰੱਥ ਬਣਾਉਂਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ ਹਾਟ-ਸਟਾਰਟ ਟਾਕ ਐਨਜ਼ਾਈਮ ਲਈ ਜੈਨੇਟਿਕ ਤੌਰ 'ਤੇ ਸੋਧਿਆ ਐਂਟੀਬਾਡੀ ਵਿਧੀ ਸ਼ਾਮਲ ਹੈ, ਜਿਸ ਨਾਲ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਵਿਸ਼ੇਸ਼ਤਾ ਵਿੱਚ ਬਹੁਤ ਸੁਧਾਰ ਹੁੰਦਾ ਹੈ।ਇਸਦੇ ਨਾਲ ਹੀ, ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਨੇ ਬਹੁ-ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਬਫਰ ਨੂੰ ਡੂੰਘਾਈ ਨਾਲ ਅਨੁਕੂਲ ਬਣਾਇਆ ਹੈ, ਜੋ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਦੀ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਕੁਸ਼ਲਤਾ ਵਿੱਚ ਸੁਧਾਰ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਘੱਟ-ਇਕਾਗਰਤਾ ਵਾਲੇ ਟੈਂਪਲੇਟਾਂ ਦੇ ਪ੍ਰਭਾਵੀ ਐਂਪਲੀਫਿਕੇਸ਼ਨ ਨੂੰ ਉਤਸ਼ਾਹਿਤ ਕਰ ਸਕਦਾ ਹੈ।ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਜੀਨੋਟਾਈਪਿੰਗ ਅਤੇ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ ਮਾਤਰਾਤਮਕ ਵਿਸ਼ਲੇਸ਼ਣ ਲਈ ਕੀਤੀ ਜਾ ਸਕਦੀ ਹੈ।
ਨਿਰਧਾਰਨ
| ਹਾਟ ਸਟਾਰਟ | ਬਿਲਟ-ਇਨ ਗਰਮ ਸ਼ੁਰੂਆਤ |
| ਖੋਜ ਵਿਧੀ | ਪ੍ਰਾਈਮਰ-ਪ੍ਰੋਬ ਖੋਜ |
| ਪੀਸੀਆਰ ਵਿਧੀ | qPCR |
| ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ | ਟਾਕ ਡੀਐਨਏ ਪੋਲੀਮੇਰੇਜ਼ |
| ਨਮੂਨੇ ਦੀ ਕਿਸਮ | ਡੀ.ਐਨ.ਏ |
ਸਟੋਰੇਜ ਦੀਆਂ ਸ਼ਰਤਾਂ
ਉਤਪਾਦ ਨੂੰ ਸੁੱਕੀ ਬਰਫ਼ ਨਾਲ ਭੇਜਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਇਸਨੂੰ 2 ਸਾਲ ਲਈ -25~-15℃ 'ਤੇ ਸਟੋਰ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਹਦਾਇਤਾਂ
1. ਪ੍ਰਤੀਕਰਮਸਿਸਟਮ
| ਕੰਪੋਨੈਂਟਸ | ਵਾਲੀਅਮ (μL) | ਅੰਤਮ ਇਕਾਗਰਤਾ |
| 2× ਟਾਕਮੈਨ ਮਲਟੀਪਲੈਕਸ qPCR ਮਾਸਟਰ ਮਿਕਸ | 12.5 | 1× |
| ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਕਸ (10 μmol/L) a | × | 0.1 - 0.5 μmol/L |
| ਪੜਤਾਲ ਮਿਸ਼ਰਣ (10 μmol/L)b | × | 50 - 250 nmol/L |
| ਰੌਕਸ ਰੈਫਰੈਂਸ ਡਾਈ | 0.5 | 1× |
| ਟੈਮਪਲੇਟ DNA/cDNA | 1-10 | - |
| ddH2O | 25 ਤੱਕ | - |
ਨੋਟ:ਜ਼ੋਰਦਾਰ ਹਿੱਲਣ ਤੋਂ ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਬੁਲਬੁਲੇ ਤੋਂ ਬਚਣ ਲਈ ਵਰਤੋਂ ਤੋਂ ਪਹਿਲਾਂ ਚੰਗੀ ਤਰ੍ਹਾਂ ਮਿਲਾਓ।
aਪ੍ਰਾਈਮਰ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ: ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਪ੍ਰਾਈਮਰਾਂ ਦੇ ਕਈ ਜੋੜੇ ਹੁੰਦੇ ਹਨ, ਆਮ ਤੌਰ 'ਤੇ ਹਰੇਕ ਪ੍ਰਾਈਮਰ 0.2 μmol/L ਦੀ ਅੰਤਮ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ 'ਤੇ ਹੁੰਦਾ ਹੈ ਅਤੇ ਉਚਿਤ ਤੌਰ 'ਤੇ 0.1 ਅਤੇ 0.5 μmol/L ਵਿਚਕਾਰ ਵੀ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
ਬੀ.ਪੜਤਾਲ ਦੀ ਇਕਾਗਰਤਾ: ਪੜਤਾਲ ਮਿਕਸ ਵਿੱਚ ਵੱਖ-ਵੱਖ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲਾਂ ਵਾਲੀਆਂ ਕਈ ਪੜਤਾਲਾਂ ਸ਼ਾਮਲ ਹੁੰਦੀਆਂ ਹਨ, ਅਤੇ ਹਰੇਕ ਪੜਤਾਲ ਦੀ ਗਾੜ੍ਹਾਪਣ ਨੂੰ ਖਾਸ ਸਥਿਤੀ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ 50 ਅਤੇ 250 nmol/L ਵਿਚਕਾਰ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
1.ਰੌਕਸ ਡਾਈ ਸੰਦਰਭ: ਇਹ ਰੀਅਲ ਟਾਈਮ ਪੀਸੀਆਰ ਐਂਪਲੀਫੀਕੇਸ਼ਨ ਯੰਤਰ ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ 'ਤੇ ਵਰਤਿਆ ਜਾਂਦਾ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਖੂਹਾਂ ਦੇ ਵਿਚਕਾਰ ਪੈਦਾ ਹੋਏ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲ ਦੀ ਗਲਤੀ ਨੂੰ ਠੀਕ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕੇ;ਇਸ ਉਤਪਾਦ ਵਿੱਚ ਰੌਕਸ ਡਾਈ ਸੰਦਰਭ ਨਹੀਂ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਲੋੜ ਹੋਵੇ ਤਾਂ Cas#10200 ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।
2.ਟੈਂਪਲੇਟ ਪਤਲਾ ਕਰਨਾ: qPCR ਬਹੁਤ ਜ਼ਿਆਦਾ ਸੰਵੇਦਨਸ਼ੀਲ ਹੈ, ਅਤੇ ਵਰਤੋਂ ਲਈ ਟੈਂਪਲੇਟ ਨੂੰ ਪਤਲਾ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ।ਜੇਕਰ ਟੈਮਪਲੇਟ ਇੱਕ cDNA ਸਟਾਕ ਹੱਲ ਹੈ, ਤਾਂ ਟੈਮਪਲੇਟ ਵਾਲੀਅਮ ਕੁੱਲ ਵਾਲੀਅਮ ਦੇ 1/10 ਤੋਂ ਵੱਧ ਨਹੀਂ ਹੋਣਾ ਚਾਹੀਦਾ ਹੈ।
3.ਪ੍ਰਤੀਕਿਰਿਆ ਪ੍ਰਣਾਲੀ: 25μL,30μL ਜਾਂ 50 μL ਦੀ ਸਿਫ਼ਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ ਤਾਂ ਜੋ ਟੀਚੇ ਦੇ ਜੀਨ ਪ੍ਰਸਾਰਣ ਦੀ ਪ੍ਰਭਾਵਸ਼ੀਲਤਾ ਅਤੇ ਦੁਹਰਾਉਣਯੋਗਤਾ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਇਆ ਜਾ ਸਕੇ।
4.ਸਿਸਟਮ ਦੀ ਤਿਆਰੀ: ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਸੁਪਰ ਕਲੀਨ ਬੈਂਚ ਵਿੱਚ ਤਿਆਰ ਕਰੋ, ਅਤੇ ਨਿਊਕਲੀਜ਼ ਰਹਿੰਦ-ਖੂੰਹਦ ਤੋਂ ਬਿਨਾਂ ਟਿਪਸ ਅਤੇ ਪ੍ਰਤੀਕ੍ਰਿਆ ਟਿਊਬਾਂ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰੋ;ਫਿਲਟਰ ਕਾਰਤੂਸ ਦੇ ਨਾਲ ਟਿਪਸ ਦੀ ਵਰਤੋਂ ਕਰਨ ਦੀ ਸਿਫਾਰਸ਼ ਕੀਤੀ ਜਾਂਦੀ ਹੈ.ਕਰਾਸ ਗੰਦਗੀ ਅਤੇ ਐਰੋਸੋਲ ਗੰਦਗੀ ਤੋਂ ਬਚੋ।
2.ਪ੍ਰਤੀਕਰਮ ਪ੍ਰੋਗਰਾਮ
| ਸਾਈਕਲ ਕਦਮ | ਟੈਂਪ. | ਸਮਾਂ | ਸਾਈਕਲ |
| ਅਰੰਭਕ-ਵਿਕਾਰ | 95 ℃ | 5 ਮਿੰਟ | 1 |
| ਵਿਕਾਰ | 95 ℃ | 15 ਸਕਿੰਟ | 45 |
| ਐਨੀਲਿੰਗ/ਐਕਸਟੈਨਸ਼ਨ | 60 ℃ | 30 ਸਕਿੰਟ |
ਨੋਟ:
1.ਐਨੀਲਿੰਗ/ਐਕਸਟੈਂਸ਼ਨ: ਤਾਪਮਾਨ ਅਤੇ ਸਮੇਂ ਨੂੰ ਡਿਜ਼ਾਈਨ ਕੀਤੇ ਪ੍ਰਾਈਮਰ ਟੀਐਮ ਮੁੱਲ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਉਚਿਤ ਰੂਪ ਵਿੱਚ ਐਡਜਸਟ ਕੀਤਾ ਜਾ ਸਕਦਾ ਹੈ।
2.ਫਲੋਰਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲ ਪ੍ਰਾਪਤੀ: ਵੱਖ-ਵੱਖ qPCR ਖੋਜ ਯੰਤਰਾਂ ਲਈ ਲੋੜੀਂਦਾ ਫਲੋਰੋਸੈਂਸ ਸਿਗਨਲ ਪ੍ਰਾਪਤੀ ਸਮਾਂ ਵੱਖਰਾ ਹੈ, ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਘੱਟੋ-ਘੱਟ ਸਮਾਂ ਸੀਮਾ ਦੇ ਅਨੁਸਾਰ ਸੈੱਟ ਕਰੋ।ਕਈ ਆਮ ਯੰਤਰਾਂ ਦਾ ਸਮਾਂ ਇਸ ਤਰ੍ਹਾਂ ਨਿਰਧਾਰਤ ਕੀਤਾ ਗਿਆ ਹੈ:
20 ਸਕਿੰਟ: ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ 7700, 7900HT, 7500 ਤੇਜ਼
31 ਸਕਿੰਟ: ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ 7300
32 ਸਕਿੰਟ: ਅਪਲਾਈਡ ਬਾਇਓਸਿਸਟਮ 7500
ਨੋਟਸ
ਕਿਰਪਾ ਕਰਕੇ ਆਪਣੀ ਸਿਹਤ ਅਤੇ ਸੁਰੱਖਿਆ ਨੂੰ ਯਕੀਨੀ ਬਣਾਉਣ ਲਈ ਜ਼ਰੂਰੀ PPE, ਜਿਵੇਂ ਕਿ ਲੈਬ ਕੋਟ ਅਤੇ ਦਸਤਾਨੇ ਪਹਿਨੋ!
